Thioridazine/Docetaxel kombinasyonunun meme kanseri kök hücre ve meme kanseri hücre kültürlerindeki sitotoksik, apoptotik ve epitelyal mezenkimal geçiş olaylarındaki etkilerinin araştırılması
Küçük Resim Yok
Tarih
2016
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/closedAccess
Özet
Önerilen bu çalışmanın birincil amacı; antipsikotik olarak kullanılan Thioridazine molekülünün, sitotoksik ve apoptotik etkinliğinin meme kanseri kök hücre kültürlerinde ve heterojen yapıdaki meme kanseri hücre kültürlerinde karşılaştırmalı olarak belirlenmesidir. İkincil amacı; görülen sitotoksik etkinin hücrelerde hangi tip ölüme yol açtığının belirlenmesidir. Üçüncü! amacı ise; kanserde sıkça görülen bir sorun olan Epitelyal-mezenkimal geçişte (EMT) bu etkiyi geri döndürücü etkisinin olup olamayacağının ve bu olayda rol oynayan moleküller üzerindeki etkisinin araştırılmasıdır. Çalışmada kullanılan MDA-MB-231, CD44+/CD24-, kök hücre olmayan kanser hücreleri ve MCF- I OA, Thioridazine'in artan konsantrasyonlarıyla (1-30 pM), 12, 24, 48, 72 saatlik zaman dilimlerinde muamele edildi. XTT tabanlı canlılık testi kullanılarak, sitotoksisite yüzdeleri hesaplandı. Thioridazine'nin hücre içi alımının Dopamin 2 reseptörleri üzerinden gerçekleştiği hipotezi dikkate alınarak, çalışılan hücrelerdeki reseptör miktarı ELISA yöntemi ile belirlendi. Sitotoksik etkinin apoptozis veya nekroza bağlı olup olmadığı ELISA yöntemi ile histon-DNA fragmentasyonu ölçülerek kanıtlandı. EMT'nin araştırılmasında, invazyon, migrasyon ve western blot yöntemlerinden yararlanıldı. MDA-MB-231 ve CD44+/CD24-, hücrelerinde Thioridazine'in erken dönemde (24. saat) etkili olduğu gösterildi. Bu süreye ait IC50 değerleri sırasıyla, 18.1 1.1M ve 9 İİM olarak hesaplandı. Dopamin 2 reseptörünün bazal miktarı, CD44+/CD24- için 868.5 ng/mL, MDA-MB-231 için 1115.4 ng/mL olarak tespit edildi. Thioridazine'in artan konsantrasyonlarına bağlı olarak dopamin 2 reseptör miktarında azalma gözlendi. Antiproliferatif etkinin, MDA-MB-231 hücrelerinde otofajiye yol açarken, CD44+/CD24- hücrelerinde apoptozise yol açtığı belirlendi. Her iki hücre hattında da EMT'yi indükleyen moleküllerde (N-kaderin, Fibronektin, Vimentin) azalma gözlenirken, E-kaderin, CK-18 gibi epiteryal belirteçlerin ekspresyonunun arttığı gözlendi.;Thioridazine, Breast Cancer, Cytotoxicity, Apoptosis, Autophagy, EMT.;Thioridazine, Meme kanseri, Sitotoksisite, Apoptozis, Otofaji, EMT.
Açıklama
Araştırma Projesi -- Ege Üniversitesi, 2016
