Meme kanserine karşı HER2/Neu antijeni ve saponin adjuvanı içeren aşı kombinasyonunun geliştirilmesi

Basit Öğe Kaydı
dc.contributor.advisorKaraboz, İsmail
dc.contributor.advisorNalbantsoy, Ayşe
dc.contributor.authorÖzverel, Cenk Serhan
dc.date.accessioned2020-11-17T08:25:31Z
dc.date.available2020-11-17T08:25:31Z
dc.date.issued2018en_US
dc.date.submitted2018
dc.departmentFen Bilimleri Enstitüsüen_US
dc.description.abstractGünümüz meme kanser vakalarının %20’sini HER2 pozitif meme kanseri oluşturmaktadır. Normal hücrelerde epitel büyüme faktör reseptörü görevi olan HER2, kanser hücrelerinde overeksprese olmakta ve kanseri ve kanseri oldukça agresif bir foruma dönüşmektedir. Günümüz kanser tedavi yöntemleri hasta vücudunda birçok yan etkiyi de beraberinde getirmektedir. Bu nedenden dolayı, güncel kanser tedavi araştırma çalışmaları immünoterapötik yöntemlere yönelmiştir. İmmünoterapi, kısaca vücudun bağışıklık sistemini kullanarak kanser hücrelerine karşı tetikleme yöntemi olarak bilinmektedir. Yürütülen tez çalışmasında, yeni bir kombinasyon immünoterapi modeli olarak HER2/Neu antijenni yüklenen dedritik hücre bazlı aşı ile saponın adjuvanını (QS-21) birlikte kullanarak bir kombinasyon immünoterapi modeli geliştirilmeye çalışılmıştır. Çalışmada anti–PD-L1 monoklonal antikoru ve kemoteropötik ajan olan doksorubisin içeren farklı formülasyonlar da çalışmaya dahil edilmiştir. Bu aşı sayeside hem bağışıklık hücrelerinin tümöre karşı tetiklenmesi, hemde tümör hücrelerinin immün sistemden evazyonunun englllenmesi hedeflenmiştir. Yürütülen tez çalışması 2 ana deney seti kurularak gerçekleştirilmiştir. Kurulan ilk deney setinde, aktif immünoterapi ile pasif immünoterapi birlikte kullanılmıştır. İlk deney setinde 1.5x106 hücre/ml HER2 pozitif 4T1 hücreleri 6-8 haftalık farelere çalışmalının 0. Gününde Xenograft model oluşturulmuş ve aşılama prosedürü 1. Gün başlayıp; haftada 1 kere toplam 2 hafta boyunca uygulanmıştır. Çalışmada anti-PD-L1 monoklonal antikoru ise 4. Ve 9. günlerde farelere uygulanmıştır. İkinci deney setinde ise aktif ve pasif immünoterapi yaklaşımlarına ek olarak kemoterapötik bir ajan olan doksorubisin de eklemiştir. İkinci deney setinde ise 5x106 hücre/ml HER2 Pozitif 4T1 hücreleri 6-8 haftalık farelere çalışmanın 0. Gününde enjekte edilmiş, ve aşılama prosedürü 4. Gün başlayıp; haftada 1 kere toplam 2 hafta bıyunca uygulanmıştır. Çalışmada anti-PD-L1 monoklanal antikoru ise 4. ve 9. günlerde farelere uygulanmıştır. Doksorubisin ise, çalışmanın 5. ve 10. günlerinde farelere uygulanmıştır. Çalışma sonunda sakrifiye edilen farelerin ağırlıkları ve tümör boyut ölçümü yapıldıktan sonra tümör, dalak dokuları ve kan örnekleri toplanmıştır. Kullanılan aşı kombinasyon etkinliğini belirlemek amacı ile LDH, assay, folow sitometri ile CD8+ T hücre, ELISA ile HER2 spesifik antikor (IgG, IgG1, IgG2a) tayini ve immünohistokimya (CD4+, CD8+, CD61+) çalışmaları yürütülmüştür. Çalışmada farklı aşı kombinasyonu denenmiş ve elde edilen bulgularda etkili aşı kombinasyonlarında tümör hacimlerinde anlamlı küçülmeler gözlemlenmiştir. İlk çalışmada DH+HER2/Neu+QS-21+anti-PD-L1 kombinasyonu en etkili kombinasyon olarak öne çıkmış ve LDH spesifik Sitotoksite çalışmasında %35-40 hücre ölümüne neden olmuştur. Uygulanan aynı formülasyona ait fare grubundan alınan kan serum örneklerinde anti-HER2 antikor titresi anlamlı düzeyde yüksek çıkmış, ve bu gruba ait total CD8+T hücre popülasyonu ile IFN-γ salgılayan CD(+ T hücre popülasyonunda kontrol ile diğer aşı gruplarına göre anlamlı farklar elde edilmiştir. Bunun yanı sıra CD4+, CD8+ ve CD61+ hücre popülasyonlarının incelendiği immünohistokimya çalışmaları ile elde edilen bulgular birbiriyle paralel olmaktadır. En etkili formülasyon olarak bulunan gruba ait olan tümör kesitlerinde immün hücre popülasyonunda diğer gruplara göre artış olduğu gözlemlemiştir. Yürütülen 2. Çalışmada ise en etkili kombinasyon Doksorubisin+DH+HER2/Neu+QS-21+anti-PD-L1 kombinasyonu olarak öne çıkmış ve LDH spesifik sitotoksite çalışmasında %45-50 hücre ölümüne deneden olmuştur. Uygulanan ayni formülasyona ait fgare grubundan alınan kan serum örneklerinde anti-HER2antikor titresi anlamlı bir şekilde yüksek çıkmış, ve bu gruba ait total CD8+ T hücre popülasyonu ile IFN-γ salgılayan CD8+ T hücre popülasyonunda anlamlı farklar elde edilmiştir. Bunun yanı sıra CD4+, CD8+, ve CD61+ hücre popülasyonlarının bakıldığı immünohistokimya çalışmaları ile elde edilen bulgular birbirine paralel olmaktadır. En etkili formülasyon olarak bulunan gruba ait tümör kesitlerinde immün hücre popülasyonunda diğer gruplara göre artış olduğu gözlemlenmiştir. Kullanılan immün kontrol noktası inhibisyonuna neden olan mAb’ı ile aşı etkinliğinin arttığı gözlemlenmiş ve kullanılan aktif immünoterapi ajanı olan dendrtik hücrenin etkinliğini de artırdığı belirlenmiştir. Kemoterapi ile birlikte kullanıldığında ise immünoterapötik kombinasyonun etkidi daha da artmıştır.en_US
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/11454/60569
dc.language.isotren_US
dc.publisherEge Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsüen_US
dc.relation.publicationcategoryTezen_US
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccessen_US
dc.subjectHER2en_US
dc.subjectPeptid Aşısıen_US
dc.subject4T1-HER2en_US
dc.subjectDoksorubisinen_US
dc.subjectİmmünoterapien_US
dc.subjectDendritik Hücreen_US
dc.subjectPD-L1en_US
dc.subjectMeme Kanserien_US
dc.subjectPeptide Vaccineen_US
dc.subject4T1-HER2en_US
dc.subjectDoxorubicinen_US
dc.subjectİmmunotherapyen_US
dc.subjectDendritic Cellen_US
dc.subjectPD-L1en_US
dc.subjectBreast Canceren_US
dc.titleMeme kanserine karşı HER2/Neu antijeni ve saponin adjuvanı içeren aşı kombinasyonunun geliştirilmesien_US
dc.title.alternativeInvestigating a novel vaccine combination composed of HER2/Neu antigen and a saponin adjuvant against HER2 positive breast Canceren_US
dc.typeDoctoral Thesisen_US

Dosyalar

Orijinal paket
Listeleniyor 1 - 1 / 1
Küçük Resim
İsim:
cenkserhanozverel2018.pdf
Boyut:
9.92 MB
Biçim:
Adobe Portable Document Format
Açıklama:
Doktora Tez Dosyası
İndir
Lisans paketi
Listeleniyor 1 - 1 / 1
Küçük Resim Yok
İsim:
license.txt
Boyut:
1.44 KB
Biçim:
Item-specific license agreed upon to submission
Açıklama:
İndir

Koleksiyon

Fen Bilimleri Enstitüsü Tez Koleksiyonu