Katı kültür fermentasyonu ile aktinomiset M135-3'den aktinomisin D üretimi
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2012
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Bu çalışmada, izolat M135-3 kullanılarak aktinomisin D üretiminin istatistiksel yaklaşımlarla katı kültür üretim optimizasyonu amaçlanmıştır. İlk aşamada 16S rDNA dizi analizi ile izolat, Streptomyces sp. M135-3 olarak tanılanmıştır. Fermentasyon çalışmalarında katı substrat olarak patates ve tavuk tüyü, katı destek materyali olarak zeolit değerlendirilmiş ve katı substrat olarak patates kullanılmasına karar verilmiştir. Ardından aktinomisin D üretiminde etkisi olabilecek parametreler (inokulüm miktarı, patates miktarı başlangıç nem, K2HPO4, NaNO3, (NH4)2HPO4, soya unu, MgSO4, CaCO3 ve NaCl) Plackett Burman tasarımı ile değerlendirilmiş ve seçilen anlamlı parametreler ile optimizasyonun ikinci aşamasına geçilmiştir. Merkezi Kompozit Dizayn ile Plackett Burman'da anlamlı etkisi bulunan; substrat, inokulum miktarı, nem ve K2HPO4 değişkenlerinin üretime 5 aşamalı etkisi incelenmiştir. Tüm aşamalarda aktinomisin D miktarı UPLC (Ultra Performans Liquid Chromatography) metodu ile belirlenmiştir. Streptomyces sp. M135-3 suşu ile Aktinomisin D üretiminde tasarım modeli en ideal katı kültür fermentasyon şartlarının 11,73 gr patates, 187x106cfu spor, %40 nem ile gerçekleşeceğini göstermiştir. Modelin öngördüğü bu şartlarda üç tekrarlı gerçekleştirilen fermentasyonla beklenen 7.4 mg aktinomisin D verimi doğrulanarak üretim 14 kat arttırılmış ve 0.63 mg/g aktinomisin d elde edilmiştir.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Aktinomisin D, Streptomyces, Katı Kültür Fermentasyonu, Central Composite Design, Yanıt Yüzeyi Yöntemi, İstatistiksel Optimizasyon, UPLC., Actinomycin D, Streptomyces, Solid State Fermentation, Central Composite Design, Response Surface Methodology, Statistical Optimization, UPLC., Biyoteknoloji A.B.D.