Terapötik amaçlı kullanılan eksozomların kontrollü biyoreaktör ortamında üretilmesinin ve izolasyonunun optimizasyonu
Küçük Resim Yok
Tarih
2023
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/closedAccess
Özet
Nanopartiküler taşıyıcı sistemler, taşıdıkları ilacı ya da antijenik materyali serumdaki enzimlerden koruyan, ideal olarak 10-100 nm boyutlarında olan, vücuda zarar vermeyen maddelerden hazırlanan partiküllerdir. Lipozomlar, polimerik nanopartiküller, emülsiyonlar, virüs benzeri parçacıklar, inorganik nanopartiküller ve eksozomlar taşıyıcı olarak kullanılan yapılardır. Eksozomlar, doğal lipozomlar olarak adlandırılmaktadır ve vücut hücrelerinden salınan, 20-100 nm boyutlarındaki nanokeseciklerdir. Eksozomların keşfinden bugüne hem taşıyıcı sistem olarak hem de çeşitli hastalıklarda erken tanı ve tedavi aracı olarak kullanımına ilişkin araştırmalar devam etmektedir. Ancak, klinikte kullanımı için yeterli miktarda eksozom üretimi, izolasyonu ve çeşitli yükleme stratejileri ile ilgili sorunlar tam olarak çözüme ulaşamamıştır. Bu çalışmada, insan monosit hücre hattı olan THP-1'in serum ve hayvansal protein içermeyen kimyasal olarak tanımlanmış besin ortamına (FBCD) adaptasyonu, hücrelerin büyük ölçekte üretiminin optimizasyonu, hücrelerden eksozom izolasyonu sırasında büyük ölçeğe daha uygun olan ultrafiltrasyon yönteminin optimizasyonu, elde edilen eksozomların karakterizasyonu ve toksisitesinin belirlenmesi adımları gerçekleştirilmiştir. Kademeli adaptasyon ile FBCD ortamına THP-1 hücreleri adapte edilirken serum oranı %5'in altına düştüğünde hücrelerin zorlandığı ve daha fazla pasajlanarak adapte olabildiği belirlenmiştir. Adapte edilen hücreler, başlangıç hücre konsantrasyonun belirlenmesi amacıyla erlende ve sonra karıştırma hızının belirlenmesi amacıyla da spinnerda üretilmiştir. Spesifik güç girişi sabit tutularak 1L çalışma hacimli karıştırmalı tank biyoreaktöre ölçek büyütülmüş ve üretim parametreleri optimize edilmiştir. Hücre süpernatantının 125 rpm akış hızı ile çapraz akışlı ultrafiltrasyon sistemine beslemenin eksozom izolasyonu için optimum olduğu belirlenmiştir. İzole edilen eksozomların 92.5 ± 5.51 nm boyutta olduğu ve L929 hücrelerinde toksisite göstermediği belirlenmiştir.;Eksozom, nanopartiküler taşıyıcı sistem, büyük ölçek optimizasyonu; THP-1 hücreleri.;Exosome, nanoparticle delivery system, large-scale optimization, THP-1 cells, Hepatitis B vaccine, hepatocellular carcinoma mode.
Açıklama
Mühendislik Fakültesi, Biyomühendislik A.B.D. Araştırma Projesi
Araştırma Projesi elektronik ortamda bulunmaktadır.
Araştırma Projesi elektronik ortamda bulunmaktadır.
