Hidrojel bazlı üç boyutlu tstatik kan-beyin bariyeri modeli oluşturulması
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2021
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Polielektrolit kompleksleri zıt yüklü polisakkaritlerin spontan olarak bir araya gelmesinden oluşur. Polielektrolit kompleksleri hücre kültüründe hidrojel doku iskelesi elde etmek için kullanılabilmektedir. Bu çalışmada, polinanyonik ve polikatyonik polimer solüsyonlarının daha önce kullanılmamış bir şekilde kan-beyin bariyeri modeli iskelesi olarak kullanılması hedeflenmiştir. Polikatyonik kitosan solüsyonu ve polianyonik aljinik asit solüsyonlarının belirli oranda karıştırılarak, hücrelerin in vivo ortamlarını taklit edebilmeleri için uygun bir üç boyutlu iskele oluşturmaları sağlanmıştır. Bu iskele daha önce literatürde kullanımına rastlanmamış kan-beyin bariyeri (KBB) bazal laminasını taklit edecek şekilde kullanılmıştır. In vitro KBB modeli oluşturmak amacıyla, polianyonik aljinik asit solüsyonu içerisine insan nöroblastoma hücre hattı (SH-SY5Y) ve fare astrosit hücre hattı (C8-D1A) karıştırılmış ve polikatyonik kitosan solüsyonu ile çapraz bağ oluşturması sağlanarak hidrojel elde edilmiştir. Bu kısım KBB'nin beyin kısmını taklit eden abluminal bölgeyi taklit etmiştir. Hidrojel üzerine insan mikrovasküler endotel hücreleri (HBEC-5i) ekilmiş ve KBB modelinin kan kısmını taklit eden luminal bölgeyi oluşturması hedeflenmiştir. Elde edilen modelin gerçekçiliği, transendotelyal elektrik direnci (TEER) ölçülerek ve KBB'den çok ve az geçen bazı referans moleküllerin permeabilite analizi yapılarak in vivo değerler ile karşılaştırılması sonucu belirlenmiştir. Ayrıca KBB endotel hücrelerinin sahip olması gereken sıkı bağlantı proteinlerinin ifade edilip edilmediği immunofloresans boyama yöntemi ile analiz edilmiştir. Elde edilen hidrojel KBB modelindeki HBEC-5i hücrelerinin sıkı bağlantı proteinlerini ifade ettiği, modelin 3. günün sonunda 340±22 ?.cm2 TEER gösterdiği ve kafein geçirgenliğinin in vitro model olarak kullanımına uygun olduğunu göstermiştir.;Kan-beyin bariyeri, polielektrolit kompleksi, hidrojel, kitosan, aljinik asit.;Blood-brain barrier, polyelectrolyte complex, hydrogel, chitosan, alginic acid.
Açıklama
Ege Üniversitesi Merkezi Araştırma Test ve Analiz Laboratuvarı Uygulama ve Araştırma Merkezi Araştırma Projesi
Araştırma Projesi elektronik ortamda bulunmaktadır.
Araştırma Projesi elektronik ortamda bulunmaktadır.