Anti-inflamatuvar lipid medyatörler ve mezenkimal kök hücrelerin immünomodülatuvar etkileri arasındaki ilişkinin araştırılması
Küçük Resim Yok
Tarih
2019
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Mezenkimal kök hücreler (MKH) başlangıçta kemik iliğinden izole edilmiş ve
takibinde yapılan çok sayıda araştırma ile yağ dokusu, diş dokuları, fetal dokular gibi değişik
kaynaklardan izole edilen yetişkin kök hücreleridir. Bu hücreler kıkırdak, kemik ve yağ
hücreleri gibi destek dokularına farklılaşabilmektedir. Ancak onların en önemli kullanım
alanları eşsiz immünomodülasyon yeteneklerinden dolayı ölümcül akut graft versus host
disease (GVHD) başta olmak üzere farklı otoimmün hastalıklardır.
Bu çalışma ile anti-inflamatuvar lipid medyatörler olan Lipoksin A4 ve Resolvin D1
moleküllerinin MKH’lerin immünomodülasyon yeteneklerine olan etkilerini araştırmayı
amaçladık. Bu amaçla yağ dokusu kökenli MKH’ler ile aktive edilmiş periferik kan
mononükleer hücreleri (PBMC) farklı efektör:target oranlarında ko-kültür ettik. Lipoksin A4
ve Resolvin D1 etkinliğini daha iyi anlamak için MKH’lere 15-lipoksijenaz (15-LOX) genini
kodlayan plazmit transfeksiyonu yapılarak aynı deneyleri tekrarladık. Etkinlikleri kıyaslamak
için hücre kültürü süpernatantlarından Lipoksin A4, Resolvin D1, IFN-g, IL-4, IL-10 ve IL-17a
düzeylerini ELISA yöntemi ile tespit ettik.
Bulgularımıza göre Lipoksin A4’ün MKH’lerin immünomodülasyon yeteneklerini
özellikle yüksek E:T oranlarında arttırabildiğini gözlemledik. 15-LOX trasnfeksiyonu yapılan
hücrelerin immünmodülasyon etkilerinin naive MKH’lere göre anlamlı olarak daha yüksek
olduğunu gözlemledik. Sonuç olarak, Lipoksin A4 ve Resolvin D1 moleküllerinin naive MKH’lerin
immünomodülasyon yetenekleri üzerinde direk bir etki oluşturmayabileceğini, ancak bu
moleküllerin sentezlerinde direk rol alan 15-LOX enzimini eksprese eden MKH’lerin normal
hücrelerden daha üstün bir etkiye sahip olduklarını bulduk. Daha kesin sonuçlara ulaşmak için
in-vitro deneyler ile bulduğumuz bu verilerin in-vivo modeller ile desteklenmesine gereksinim
bulunmaktadır.
Mesenchymal stem cells (MSCs) are adult stem cells that initially isolated from bone marrow and after the large number of follow-up studies they also could isolated from a variety of sources, including fat tissue, dental tissues, fetal tissues. These cells can differentiate into the mesenchymal cells such as cartilage, bone and fat cells. However, due to their unique immunomodulation ability, they are used in the clinic, especially lethal acute graft versus host disease (GVHD) and different autoimmune diseases. In this study, we aimed to investigate the effects of anti-inflammatory lipid mediators Lipoxin A4 and Resolvin D1 molecules, on the immunomodulation ability of MSCs. For this purpose, we co-cultured activated peripheral blood mononuclear cells (PBMC) with adipose tissue-derived MSCs at different effector: target ratios. In order to better understand the efficacy of Lipoxin A4 and Resolvin D1 we were repeated the same experiments by conducting a plasmid transfection encoding the 15-lipoxygenase (15-LOX) gene in MSCs. In order to compare the activities, we were determined the levels of Lipoxin A4, Resolvin D1, IFN-g, IL- 4, IL-10 and IL-17a from cell culture supernatants by ELISA. According to our findings, we observed that Lipoxin A4 increased the immunomodulation ability of MSCs especially at high E:T ratios. We observed that the immunomodulation effects of 15-LOX transfected cells were significantly higher than the naive MSCs. In conclusion, we have found that Lipoxin A4 and Resolvin D1 molecules may not have a direct effect on the immunomodulation ability of naive MSCs, but that MSCs expressing 15- LOX enzyme, which plays a direct role in the synthesis of these molecules, may show a superior effect compared with normal cells. In order to reach more accurate results, we need to support our data with in-vivo models.
Mesenchymal stem cells (MSCs) are adult stem cells that initially isolated from bone marrow and after the large number of follow-up studies they also could isolated from a variety of sources, including fat tissue, dental tissues, fetal tissues. These cells can differentiate into the mesenchymal cells such as cartilage, bone and fat cells. However, due to their unique immunomodulation ability, they are used in the clinic, especially lethal acute graft versus host disease (GVHD) and different autoimmune diseases. In this study, we aimed to investigate the effects of anti-inflammatory lipid mediators Lipoxin A4 and Resolvin D1 molecules, on the immunomodulation ability of MSCs. For this purpose, we co-cultured activated peripheral blood mononuclear cells (PBMC) with adipose tissue-derived MSCs at different effector: target ratios. In order to better understand the efficacy of Lipoxin A4 and Resolvin D1 we were repeated the same experiments by conducting a plasmid transfection encoding the 15-lipoxygenase (15-LOX) gene in MSCs. In order to compare the activities, we were determined the levels of Lipoxin A4, Resolvin D1, IFN-g, IL- 4, IL-10 and IL-17a from cell culture supernatants by ELISA. According to our findings, we observed that Lipoxin A4 increased the immunomodulation ability of MSCs especially at high E:T ratios. We observed that the immunomodulation effects of 15-LOX transfected cells were significantly higher than the naive MSCs. In conclusion, we have found that Lipoxin A4 and Resolvin D1 molecules may not have a direct effect on the immunomodulation ability of naive MSCs, but that MSCs expressing 15- LOX enzyme, which plays a direct role in the synthesis of these molecules, may show a superior effect compared with normal cells. In order to reach more accurate results, we need to support our data with in-vivo models.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Mezenkimal Kök Hücre, İmmünomodülasyon, Lipoksin, Resolvin, Mesenchymal Stem Cell, Immunomodulation, Lipoxin, Resolvin
