PANC-1 hücre hattında Resveratrol'ün NF-KB ve hTERT ekspresyonuna bağlı telomeraz aktivitesine etkisi

Erken teşhisi ve diğer pankreatik hastalıklardan ayrımı oldukça zor olan pankreas kanseri, başta gelişmiş ülkeler olmak üzere dünyadaki en ölümcül malign neoplazmlardan biridir. Kanser hücrelerinde meydana gelen sınırsız çoğalma yeteneği ile ortaya çıkan ölümsüzlük, telomeraz enziminin artmış aktivitesiyle ilişkilendirilmektedir. Telomeraz aktivasyonu, insan kanserlerinin yaklaşık % 85'inin gelişiminde kritik bir adımdır ve henüz kanser hücrelerinde telomerazın yeniden nasıl aktive edildiği tam olarak anlaşılamamıştır. Bu nedenle kanser tedavisinde telomeraz aktivitesinin inhibisyonu önemli tedavi seçeneklerinden biri gibi gözükmektedir. Bu tez kapsamında pankreas duktal adenokarsinom hücre hattı olan PANC-1' de doğal bir bileşik olan Resveratrol'ün, telomerazla ilişkilendirilmiş genler olan hTERT ve NF- ?B gen ifadesi ve dolayısıyla pankreas kanser gelişimi üzerindeki etkileri incelenmiştir. PANC-1 hücre hattı uygun ortam ve koşullarda çoğaltılarak WST-1 reaktifi ile proliferasyon ve sitotoksisite analizleri gerçekleştirilmiş ve bunların ışığında Resveratrol için IC50 değeri belirlenmiştir. Belirlenmiş olan IC50 dozu kullanılarak; apoptoz, yara kapanma analizi ve telomeraz ilişkili genler olarak belirlediğimiz hTERT ve NF-?B ekspresyon düzeyleri RT-PCR analizleriyle değerlendirilmiştir. Saptadığımız bulgular ışığında Resveratrol'ün PANC-1 hücre hattı üzerinde sitotoksik etkisi olduğu tespit edilmiş olup, IC50 değeri 72. saatte 75, 80 ?M olarak hesaplanmıştır. Tespit edilen IC50 değeri PANC-1 hücre hattına uygulanarak apoptotik etkisi değerlendirilmiştir. Apoptoz sonuçları Annexin V ile değerlendirilmiş ve sonuçlara göre de % 41, 9 oranında apoptotik etki tespit edilmiştir. Resveratol'ün PANC-1 hücre hattında hücre migrasyonu ve invazyonuna olan etkisi yine IC50 değeri uygulanarak bakıldığında, 72. saatlik değeri kontrolle kıyaslandığında % 47 oranında hücre göçünü engelleyerek yara hattının kapanmasında gecikmeye neden olduğu tespit edilmiştir. Telomeraz ile ilişkili olarak saptadığımız genler olan hTERT ve NF-?B gen ifadeleri, IC50 dozu uygulanan PANC-1 hücre hattından elde edilen RNA'lar cDNA'ya çevrilerek LightCycler 480 cihazında RT-PCR ile değerlendirilmiştir. Bu değerlendirme sonunda Resveratrol'ün, hTERT geninde 1, 37 kat, NF-?B geninde ise 1, 55 kat ekspresyon seviyesinde artışa neden olduğu saptanmıştır. Sonuç olarak Resveratrol PANC-1 hücre hattında sitotoksik etki göstererek apoptoza neden olmuştur. Ayrıca hücre migrasyonunu engelleyerek hücre göçünü engellemiştir. Fakat telomeraz ile ilişkilendirdiğimiz gen ifadelerinde beklenen azalma gözlenmemiştir. Bu nedenle çalışmamız deney kapsamını genişleterek devamlılığını gerektirmektedir.;Resveratrol; telomeraz; hTERT; NF- KB; pankreas kanseri.;Resveratrol; telomerase; hTERT; NF- KB; pancreatic cancer.