Miyoglobinin elektrokatalitik indirgenmesine dayalı 2. nesil biyosensör geliştirilmesi ve H2O2 tayininde kullanılması
Küçük Resim Yok
Tarih
2010
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/closedAccess
Özet
Biosensor, Myoglobin, H2O2, Amperometry.;Biyosensör, Miyoglobin, H2O2, Amperometri.;Bu tez çalısmasında miyoglobinin elektrokatalitik indirgenmesine dayalı ikinci nesil amperometrik biyosensör gelistirilmesi ve H2O2 tayininde kullanılması amaçlanmıstır. Miyoglobin temelli biyosensör sisteminde sisteaminle elektrot yüzeyinde kendiliginden olusan tek tabaka olusturulup miyoglobinin immobilizasyonundan sonra glutaraldehitle çapraz baglanmıstır. Olusturulan biyosensör sistemiyle H2O2 ölçümleri - 0,3V'ta amperometrik metod kullanılarak yapılmıstır. Miyoglobin temelli H2O2 biyosensöründe ölçümler amperometrik yöntem kullanılarak H2O2 derisimi ile dogru orantılı olarak artan akım degerlerinin belirlenmesi ile gerçeklestirilmistir. Hazırlanan biyosensörlerin optimizasyon çalısmalarında öncelikle optimum SAM olusum süresi, optimum sisteamin konsantrasyonu, optimum miyoglobin konsantrasyonu, optimum glutaraldehitte bekletme süresi gibi parametreler çalısıldı. Çalısma kosullarının optimizasyonunda pH optimizasyonu ve sıcaklık optimizasyonu gerçeklestirildi. Daha sonra karakterizasyon çalısmalarında miyoglobin temelli H2O2 biyosensörü için dogrusal tayin grafigi ve tekrarlanabilirlik belirlendi. Optimizasyon çalısmaları sonucunda H2O2 biyosensörü için en uygun protein miktarı, miyoglobinde bekletme süresi, sisteamin ile SAM olusturma zamanı, sisteamin konsantrasyonu ve glutaraldehitte bekletme süresi sırasıyla 10 mg/ml Mb, 4 saat miyoglobin çözeltisinde bekletme, 16 saat sisteaminde bekletme, 100 mM sisteamin konsantrasyonu ve 1 saat glutaraldehitte bekletme olarak bulunmustur. Çalısma kosullarının optimizasyonu amacıyla yapılan denemelerde H2O2 biyosensörü için çalısma tamponu olarak 50 mM pH:7 fosfat tamponu ve çalısma sıcaklıgı olarak 25oC bulunmustur. H2O2 biyosensörü için yapılan karakterizasyon çalısmalarında ise 5 oM - 100 oM aralıgında H2O2 için dogrusal sonuçların alındıgı belirlenmistir. Tekrarlanabilirlik denemelerinde (n=7) 50 mM H2O2 konsantrasyonunda ortalama deger x = 52.665 oM, standart sapma (S.S) = ± 2.375 ve % varyasyon katsayısı (V.K) = 4.51 olarak bulunmustur.
Açıklama
Araştırma Projesi -- Ege Üniversitesi, 2010
