İnsan papiller tiroid kanseri hücre hattında resveratrolün BRAF, ERK ve NIS ekspresyonu üzerine etkilerinin Western Blot Yöntemiyle değerlendirilmesi
Küçük Resim Yok
Dosyalar
Tarih
2017
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Tiroid kanserleri en sık görülen endokrin neoplazilerdir. İnsidansı her iki cinste de hızla artmaktadır. Genellikle iyi prognozlu olmasına rağmen küçük bir grup hastada hızlı seyir, invazyon ve radyoaktif iyot tedavisine direnç görülebilmektedir. BRAF papiller tiroid kanseri oluşumunda ve malignitenin sürdürülmesinde önemli olan, tüm papiller tiroid karsinomlarında ortalama %40 sıklıkla görülen bir mutasyondur. BRAF pozitifliği erken invazyon, metastaz ve iyot yakalama kapasitesinde azalma ile ilişkilidir. Resveratrol bitkisel kökenli bir fitoalexindir. Çeşitli tümör hücrelerinde büyüme inhibisyonu, apoptoz indüklenmesi, invazyonun engellenmesi gibi etkileri gösterilmiştir. Tiroid kanser hücreleri üzerinde de apoptozu indüklediği gösterilmiştir. Bu çalışmadaki amacımız resveratrol'ün tiroid papiller kanser hücrelerinde BRAF, ERK ve NIS ekspresyonları üzerine etkisinin western blot yöntemiyle doğrulanmasıdır. İnsan B-CPAP papiller tiroid karsinom hücreleri resveratrol'ün 10- 100 µM konsantrasyonlarında 24-48-72 saat süreyle muamele edildi. Hücre canlılığı XTT Cell Proliferation Assay" ile değerlendirildi. ekspresyonları rt-PCR metoduyla değerlendirildi. Resveratrolün B-CPAP hücrelerinde zaman ve doza bağımlı bir şekilde hücre proliferasyonunu engellediği görüldü. Resveratrol'ün IC50 değeri 48 saatte 18,7 µM, 72 saatte 56,8µM olarak ölçüldü. Daha önceki kendi çalışmamızda rt-PCR yöntemiyle 48 saatte 20 µM resveratrol ile BRAF mRNA ekspresyonunda 1,5 kat; 72 saatte 50 µM ile 0,5 kat azalma gözlendi. ERK mRNA düzeyinde 48 saatte 20 µM ile 5,5 kat azalma;72 saatte 50 µM ile 5 kat azalma meydana geldi. NIS mRNA ekspresyonunda ise 48 saatte 20 µM ile 3 kat azalma meydana gelirken 72 saatte 50µM ile 1,5 kat artış meydana geldi. Bu çalışmayla resveratrolün tiroid papiller karsinom hücre proliferasyonunu inhibe ettiği ve kötü prognostik BRAF ve ERK mRNA ekspresyonlarını azalttığı gösterilmişti. Bu çalışmada önceki çalışmada rt-PCR ile elde edilen bulguların doğrulanması amaçlandı. Daha önceden saptanılan IC 50 değerlerinde resveratrol ile muamele edilen BCPAP hücrelerinde önceki çalışmanın sonuçlarıyla uyumlu olarak 48 ve 72. Saatlerde BRAF ve ERK proteinlerinde azalma ve NIS proteininde artış saptandı. Çalışmamız Resveratrolün dirençli papiller tiroid kanseri hastalığında yeni bir tedavi edici ajan olarak ileri çalışmalarla değerlendirilebileceğini düşündürmektedir.;Resveratrol, Tiroid kanseri, BRAF, NIS, ERK.;Resveratrol, Thyroid Carcinoma, BRAF, NIS, ERK.
Açıklama
Araştırma projesi -- Ege Üniversitesi, 2017
