Bazı alkanna türlerinin ekstre ve fraksiyonlarının DNA topoizomerazı inhibisyonu üzerindeki etkilerinin araştırılması
Yükleniyor...
Tarih
2006
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Bu çalışmada, Alkanna türleri metanolik ekstrelerinin (A. tubulosa, A. cordifolia, A. tinctoria, A. hirsutissima, A. orientalis), MTT testi kullanılarak 5 kanser (K562, MCF7, HL60, SaOs2, Hep-3B) ve 2 normal hücre hattına karşı (L929, Vero) sitotoksik etki taramaları yapılmıştır. Yüksek sitotoksisite gösteren Alkanna türleri, süper sarmal plazmid DNA gevşeme testi ile DNA Topoizomeraz I inhibisyon potansiyelleri değerlendirilmiştir. Türler arasında A. cordifolia 8 G/mLʼden 32 G/mLʼye kadar artan dozlarda kültüre hücre hatlarına karşı inhibisyon etkisi göstermiştir. Önemli sitotoksisite ve DNA topoizomeraz I inhibisyonu gösteren A. cordifolia, ileri izolasyon için seçilmiştir. Ön fraksiyonlamada A. cordifolia metanolik ekstresi, optimum fraksiyonlama sistemini belirlemek amacıyla farklı stasyoner fazlarda (Silika jel, Kar ıt faz-C18 and Sephadex LH20) Açık Kolon Kromatografisi ve Vakum Sıvı Kromatografisiʼne uygulanmıştır. Silika jel kolondan S2, S9, S10 ve Kar ıt faz-C18ʼden RP5, RP6, RP7, RP8 fraksiyonları, 10 ng/mL konsantrasyonda güçlü DNA topoizomeraz I inhibisyonu gösterirken, Sephadex LH20ʼden elde edilen SF2 fraksiyonu inhibitör aktivite sergilememiştir. Büyük ölçekli fraksiyonlama, normal faz silika jel kullanılarak, Biotage SP2 Yüksek Performans Flaş Kromatografiʼde gerçekleştirilmiştir. Çünkü aktif fraksiyonlar, silika jel ile iyi bir dağılım göstermiştir. Biotage Flaş Kromatografiʼden .T.K. profillerine göre 27 alt fraksiyona ayrılan 536 fraksiyon toplanmıştır. 69-80; 81-91; 92-110 arası fraksiyonlar ve hekzan ekstresi, 10 ng/mL konsantrasyonda aktif bulunmuş iken, 1 ng/mL seviyesinde DNA topoizomeraz I inhibisyonu gözlenmemiştir.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Alkanna, Boraginaceae, Biyoaktivite Rehberli Fraksiyonlama, DNA Topoizomeraz I nhibisyonu, Sitotoksisite, MTT., Alkanna, Boraginaceae, Bioassay Guided Fractionation, DNA Topoisomerase I nhibition, Cytotoxicity, MTT., Biyomühendislik A.B.D.
