Lökomogenezde ifadesi azalmış miRNA'ların polietilen glikol-polietilenimin nanopartikülü aracılı lösemi hücrelerine non-viral transfeksiyonu ile lösemi modellerinde mikrodizin transkriptom analizi
Küçük Resim Yok
Tarih
2014
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/closedAccess
Özet
Bu çalısmada lösemide ifadesi azalan miR-150, PEG-PEI nanopartikülü aracılıgı ile hücrelere transfekte edilip, lökomogenezde asagı regülasyon gösteren tümör süpresör miR-150 - nin yerine konması ile gen ekspresyon degisimlerinin mikrodizin transkriptom analizi ile belirlenmesi amaçlanmıstır. Bu amaçla, hücre hatlarından K-562 ve KU812 hücre hatları kronik myeloid lösemi modeli ve kontrol grubu olarak NCI-BL2347 ve NCIBL2171 lösemi olmayan normal hücre hatları kullanılmıstır. PEG-PEI kopolimerlerinin karakterizasyon çalısmaları yapılmıs ve bu kopolimerler kullanılarak 9 nanopartikül formülasyonu hazırlanmıstır. Gelistirilen nanopartikül formülasyonlarının karakterizasyon ve stabilite çalısmaları yapılmıstır. Üç kooplimer T1, T3 ve T9 ileri çalısmalar için uygun bulundu ve F1, F2 ve F3 formülasyonlarıyla yapılan karakterizasyon çalısmaları sonucunda, <300 nm partikül boyutuna sahip oldukları gözlenmistir. K562 lösemi hücre modelinde nanopartikül aracılı ifadesi azalan miR- 150' nin yerine konması ile hücre döngüsü kontrol genlerinden CDK2 7 kat, CCNG2 ve CDK6 2 kat azaldıgı saptandı. Apoptozda görevli genlerden TNFRSF9, TNF ve DAPK1 2 kat azaldıgı belirlendi. KU812 lösemi hücre modelinde nanopartikül aracılı ifadesi azalan miR- 150' nin yerine konması ile hücre döngüsü kontrol genlerinden CHEK2 6 kat, CDK5RAP1 5 kat, CCNG2 ve CDKN1A nın ekspresyonlarının 2 kat azaldıgı saptandı. HRAS ve MYC genlerinin ekspresyonlarının 2 kat arttıgı bulundu. Apoptozda görevli genlerden AVEN in ekspresyonunun 2 kat azaldıgı belirlendi. Deregüle olan tümör süpresör miR-150'nin lösemi hücrelerine non-viral transfeksiyon ile yerine konması löseminin tedavisi için ümit verici sonuçlar vermistir. Çalısmamızdaki bulguların in vivo hayvan deneyleriyle desteklenmesi ile lösemi tedavisinde ek bir tedavi protokolü gerçeklestirilebilinecektir. İlerisi için lökomogenezde tanıya miRNA bazlı moleküler tedavi yaklasımı getirilebilinecektir.;PEG-PEI, nanoparticle, miR-150, non-viral transfection, microaray.;PEG-PEI, nanopartikül, miR-150, non-viral transfeksiyon, mikrodizin.
Açıklama
Araştırmacılar; Kevser Özgen Özer, Çığır Biray Avcı, İpek Özcan, Müsteyde Yücebaş, Tuğçe Balcı
Araştırma Projesi -- Ege Üniversitesi, 2014
Araştırma Projesi -- Ege Üniversitesi, 2014
