Selüloz asetat kürecikler yüzeyinde katalaz immobilizasyonu
Küçük Resim Yok
Tarih
1999
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/closedAccess
Özet
Oksidoredüktaz sınıfı bir enzim olan katalaz, (Hidrojen peroksit: Hidrojen peroksit Oksidoredüktaz, E.C 1.11.1.6), doğada oldukça geniş yayılım gösteren bir enzimdir. Var olmadığı canlı türü, hatta canlı dokusu yok gibidir. Günümüze kadar katalaz ile ilgili yapılan çalışmalarda molekül ağırlığı, aminoasit bileşimi, elektroforetik mobilite, aktivite ve aktiviteyi etkileyen faktörler açısından canlıdan canlıya, organdan organa, hücreden hücreye, hatta organelden organele farklılık gösteren katalaz türlerinin varlığı tespit edilmiştir. Genellikle tetramerik yapıda olan katalaz prostetik grup olarak hem içerir. Bu çalışma süt endüstrisinin bazı dallarında antimikrobiyal madde olarak kullanılan H2O2'in enzimatik eliminasyonuna zemin oluşturacak temel çalışmaları hedef almaktadır. Araştırmada taşıyıcı olarak kullanılan selüloz asetat küreciklerin hazırlanmasında orijinal bir yöntem geliştirilmiştir. Mekanik kararlılığı oldukça yüksek bu organik kökenli taşıyıcılar değişik ortamlarda çalışma imkânına sahiptirler. Enzim immobilizasyonunun dış yüzeyde yapılacak olması difüzyon problemlerini en aza indirme açısından da önemli avantajlar sağlamaktadır. Çalışmanın ilk bölümünde hazırlanan kürecikler üzerinde katalaz immobilizasyonu amacıyla, taşıyıcının NaIO4, TiCl4, TiCl3, ZrOCl2 ve Ce(SO4)2 ile aktivasyonu temel alan bir seri immobilizasyon yöntemi denendi. Çalışma koşullarına en uygun sonuç Ce(SO4)2 aktivasyonunu esas alan yöntemle elde edildi. Bu yöntem Ce(SO4)2 ile aktivasyonu takiben BSA ile uzatma kolu oluşturulması, sodyum siyanoborhidrür ile indirgeme, katalazın kovalent bağlanması ve glutaraldehit ile çapraz bağlama adımlarını içermektedir. Çalışmanın daha ileri aşamalarında söz konusu immobilizasyon yönteminde enzim ve çapraz bağlayıcı reaktif olan glutaraldehit oranlarının aktivite üzerine etkisi incelendi. İmmobilizasyonda kullanılan bileşenlerin oranlarının optimizasyonundan sonra selüloz asetat kürecikler yüzeyinde immobilize katalaz preparatlarıyla çalışma koşullarının optimizasyonu gerçekleştirildi. Bu çalışmalardan uygun değer pH, uygun tampon türü ve konsantrasyonu ve uygun değer sıcaklık araştırıldı ve bunlar sırasıyla pH: 7,0, fosfat tamponu, 50mM ve 35 - C olarak tespit edildi. Karakterizasyon çalışmalarında ise termal kararlılık, pH kararlılığı ve depo kararlılığı gibi parametreler araştırıldı. Çalışmanın son aşamasında selüloz asetat küreciklerde immobilize katalaz preparatlarının kullanımıyla süt örneklerine katılmış olan hidrojen peroksit bozunumu incelendi. Anahtar Sözcükler: Selüloz asetat, katalaz, immobilizasyon, hidrojen peroksit
Açıklama
Araştırma Projesi -- Ege Üniversitesi, 1999
