Bakterilerde dışa-atım pompası yolu ile antimikrobiyal direnç gelişimini saptamada mikrodilüsyon yöntemi ve bis-benzimidin kullanımı

Bakterilerde uzun yıllardır bilinen direnç mekanizmalarına son zamanlarda dısa-atım (efluks) pompa sistemleri eklenmistir. Bakterilerdeki dısa-atım pompa sistemleri transport proteinlerinden olusur. Bu transport proteinleri antimikrobiyal ilaçları aktif olarak hücre dısına atarak ilacın hedefine ulasmasını engellemektedir. Bu çalısmada, gram negatif bakterilerde bulunan dısa-atım pompalarına, PA?N, CCCP ve tiyoridazinin etkilerinin mikrodilüsyona dayalı pratik bir yöntem ve Bisbenzimid (Bb) maddesi kullanılarak arastırılması amaçlanmıstır. Manisa Celal Bayar Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Mikrobiyoloji A.D. Bakteriyoloji Laboratuvarında izole edilmis olan 24 adet gram-negatif bakteri kökeni (6 Escherichia coli, 6 Klebsiella pneumoniae, 6 Pseudomonas aeruginosa, 6 Acinetobacter baumannii) çalısmaya alındı. Bakteri kökenleri gerekli islemlerden sonra çalısmaya uygun süspansiyonlar haline getirildi. Bu süspansiyonlar 96 kuyucuklu siyah mikropleytlere aktarıldı. Daha sonra kuyucuklara PA?N, CCCP ve tiyoridazin ile Bb eklendi. Kuyucuklardaki floresans degerleri mikropleyt okuyucu kullanılarak belirlendi. Bu çalısmada, gram negatif bakterilerde dısa-atım pompaları üzerine en belirgin inhibitör etki PA N ile elde edildi. Egri altında kalan alana göre yapılan karsılastırmada, PA?N'nin en fazla inhibisyonu A. baumannii dısa-atım pompalarına gösterdigi saptandı. PA?N'nin en az etki gösterdigi bakteri ise K. pneumoniae oldu. CCCP'nin dısa-atım pompalarını inhibe etmedigi hatta bisbenzimid'in dısa-atımını arttırdıgı görüldü. Tiyoridazinin ise dısa-atım pompa aktivitesi üzerine etki göstermedigi sonucuna varıldı. Bakterilerde dısa-atım pompalarını inhibe eden maddeler enfeksiyon hastalıklarının tedavisinde yeni bir adım olacaktır. Ancak bu inhibitör maddelerin insanlar üzerine toksik etkilerinin olmaması ve farmakokinetik özelliklerinin uygun olması gerekmektedir. Bu konuda daha çok sayıda arastırmaya ihtiyaç vardır. Bu tez çalısmasında kullanılan yöntemi pratik olması, uygulama kolaylıgı ve kısa sürede kantitatif sonuç alınması nedeniyle diger arastırmacılar tarafından kullanılabilecegini düsünüyoruz.