Alabalıklarda (Oncorhynchus Mykiss, Walbaum) viral hemorajik septisemi (VHS) hastalığının teşhisi için ELISA yönteminin geliştirilmesi
dc.contributor.advisor | Çağırgan, Haşmet | |
dc.contributor.author | Değirmenci, Uğur | |
dc.date.accessioned | 2018-05-07T12:42:27Z | |
dc.date.available | 2018-05-07T12:42:27Z | |
dc.date.issued | 2010 | |
dc.department | Ege Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü | en_US |
dc.description.abstract | Bu araştırmada enfekte alabalık doku homejenizatından ve hücre kültüründen VHS virüsünü tespit etmek için bir enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) yöntemi geliştirildi. VHS, enfekte balık dokusundaki virüsün duyarlı doku kültürlerinde izolasyonundan sonra ELISA, virüs nötralizasyon, immunofloresans, immunoperoksidaz ve complement fiksasyon gibi serolojik testlerle identifiye edilmektedir. ELISA, tekrarlanabilir olması, kullanımının basit olması, çabuk yapılabilmesi ve ucuz olmasıyla diğer serolojik testlerden daha üstündür. ELISA bir çok şekilde uygulanabilir. Bu çalışmada VHS antijenini tespit edebilecek tavşandan elde edilen sadece bir antikor kullanılmıştır. Üretilen anti-VHSV F1 γ-globulin fraksiyonunun protein konsantrasyonu 28 mg/ml’dir. Mikroplak kuyucukları 10 μg/ml anti-VHSV γ-globulin fraksiyonu ile kaplandı. Daha sonra şüpheli örnek ilave edildi. Eğer örnekler virus içeriyorsa biotinlenmiş anti-VHSV γ-globulin fraksiyonu antijenle bağlanır ve biotinlenmiş γ-globulin fraksiyonu, HRP ile işaretli avidin ile reksiyona girer. TMB substrat eklenmesiyle renk şekillenir ve okuyucuda okutturulur. Bu doktora çalışması projesinde geliştirilen VHS antijen ELISA bilinen tüm VHSV subtiplerini (strain F1, HE, 23.75) ve 1/10 dilüsyondaki enfekte balık dokusu homojenizatında etkeni tespit edebilmektedir. Geliştirilen biotinavidin ELISA VHSV’ye oldukça spesifiktir ve IHNV, PFR, PR ve bilinen tüm IPNV serotipleriyle çapraz reaksiyon vermemektedir. Geliştirilen biotin-avidin antijen ELISA’nın duyarlılığı DKID50 104,75/0,1 ml’dir. | en_US |
dc.identifier.uri | https://hdl.handle.net/11454/4659 | |
dc.language.iso | tr | en_US |
dc.publisher | Ege Üniversitesi | en_US |
dc.relation.publicationcategory | Tez | en_US |
dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | en_US |
dc.subject | ELISA | en_US |
dc.subject | biotin-avidin | en_US |
dc.subject | alabalık | en_US |
dc.subject | VHSV | en_US |
dc.subject | ELISA | en_US |
dc.subject | biotin-avidin | en_US |
dc.subject | rainbow trout | en_US |
dc.subject | VHSV | en_US |
dc.subject | Su Ürünleri Yetiştiricilik A.B.D. | en_US |
dc.title | Alabalıklarda (Oncorhynchus Mykiss, Walbaum) viral hemorajik septisemi (VHS) hastalığının teşhisi için ELISA yönteminin geliştirilmesi | en_US |
dc.type | Doctoral Thesis | en_US |