İdrarda total glikozaminoglikan semi-kantitatif ölçümü için hızlı test yöntemi geliştirilmesi
Küçük Resim Yok
Tarih
2022
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/closedAccess
Özet
Giriş: Mukopolisakkaridozlar (MPS'ler), glikozaminoglikanların (GAG'lar) yıkılmasını katalizleyen lizozomal enzimlerdeki kusurlardan kaynaklı kalıtsal, metabolik bir bozukluk olup lizozomal depo hastalıklarının (LSD) bir alt grubudur. MPS organ disfonksiyonuna yol açan dokularda GAG birikimi ile sonuçlanır. Bu nedenle, GAG'lar MPS için önemli biyobelirteçlerdir. Herhangi bir tedavi olmaksızın, şiddetli MPS formları olan hastalar, yaşamın ilk yirmi yılı içinde ölürler. Bu nedenle GAG'ların doğru, hızlı, hassas ve spesifik ölçümlerinin yapılması gereklidir. Birikmiş GAG'lar çeşitli analiz teknikleri kullanılarak saptanırlar. Mevcut en yaygın yöntemlerden biri 1, 9 dimetilmetilen mavisi(DMB) katyonik bir boyanın negatif yüklü GAG'lara bağlanarak miktarının ölçülmesine dayanır. Amaç: MPS tanısında kullanılan, idrarda total GAG analizi için mevcut bulunan DMB boya bağlama yöntemiyle bütünleşmiş kağıt tabanlı, kolay ve hızlı semi-kantitatif bir tanı testi geliştirmektir. Yöntem: Ön işleme tabi tutulan ve ardından DMB emdirilmiş kağıtlara, kondroitin sülfatlı(CS) idrar damlatıldığında oluşan mor renk gözlenmiştir. Daha sonra test sistem; Kağıt türü, ön işlem için kullanılan alkol çözeltisi türü, DMB konsantrasyonu, stabilitazör ilavesi, zaman ve sıcaklık, konroitin sülfat konsantrasyonu ve girişim etkisine göre değerlendirilmiştir. Optimal test şeridi seçilerek standart grafik oluşturulmuştur. Bulgular: Optimizasyon çalışmalarından elde edilen sonuçlara göre kağıt seçilmiş ve hızlı test sistemi oluşturulmuştur. Kağıt etanolde inkübe edilmiş ve DMB10x ile boyanmış ve stabilizatör ilavesine gerek duyulmamıştır. Kurutmalar oda sıcaklığında gece boyu olması uygun bulunmuştur. Bilurubin 0, 03 mg/ml, askorbik asit 5 mg/ml ve glukoz 20 mg/ml ye kadar test şeritlerinde girişime sebep olmamıştır. CS içeren idrar ve CS içermeyen idrar arasındaki farkın gözlemlendiği en düşük idrarda ki CS konsantrasyonu 0, 04 mg/ml'dir. Optimizasyon çalışmalarından sonra yazılıma göre hesaplanan ortalama renk farklarına karşı idrardaki CS konsantrasyonun kalibrasyon eğrisi çizilmiştir ve doğrusal bir grafik(R2=0, 9722 ) elde edilmiştir. Sonuç: Total GAG'ın semi-kantitatif olarak belirlenmesi için DMB boyasının renk değişikliklerine dayalı basit, hızlı ve düşük maliyetli bir ilk kağıt tabanlı test geliştirilmiştir. Tasarlanan test kağıdı ile, normal idrarlar ile CS içeren idrarların ayırt edilebileceği gösterilmiştir. Bu çalışma, MPS riski taşıyan hastaları ön teşhisi için bir araç olarak potansiyel faydasını göstermiştir. Gelecekte, daha fazla araştırmayla birlikte MPS tiplerinin ayrılacağı daha spesifik ve rutinde kullanılabilecek bir kağıt tabanlı yöntem geliştirmek mümkündür. Ayrıca akıllı telefonlar ile kombinasyonu halinde MPS için bir tanı aracı olarak kullanılmasına ek olarak, hastaların tedavi sürecini takip etmek için bir yöntem olarak da kullanılabileceği ön görülmüştür.;Kağıt ; Hızlı ; Test ; İdrar ; Mukopolisakkaridozlar ; Glikozaminoglikanlar.;Paper ; Rapid ; Test ; Urine ; Mucopolysaccharidoses ; Glycosaminoglycans.
Açıklama
Tıp Fakültesi, Tıbbi Biyokimya A.B.D. Araştırma Projesi
Araştırma Projesi elektronik ortamda bulunmaktadır.
Araştırma Projesi elektronik ortamda bulunmaktadır.
