Bombyx mori (Lepidoptera)'nın dorsal damar ile ilişkili yeni hematopoietik organından salınan farklılaşmamış hemositler ile dolaşımdaki farklılaşmış hemositlerin in vitro koşullarda sialik asit içeriklerinin optik ve analitik yöntemlerle karşılaştırılması

Bu çalışmada, Bombyx mori (Lepidoptera) hemositlerinin (kan hücresi) gelişme sürecinde, dolaşımda bulunan farklılaşmış olgun hemositlerdeki sialik asitler ile hematopoietik organda (HPO) bulunan farklılaşmamış hemositlerdeki sialik asit içerikleri belirlenmiştir. Optik olarak, floresans mikroskop ile hemositlerin glikokonjugatlarõnda bulunan sialik asit tiplerinin bağlanma durumu FITC işaretlenmiş lektinler (MAA-Maackia amurensis aglutinin-Ü2,3 bağlı sialik asitlere özgün, SNA- Sambucus nigra aglutinin-Ü2,6 bağlı sialik asitlere özgün ve LFA- Limax flavus aglutinin-sialik asitlerin tüm bağlarına özgün) kullanılarak bakılmıştır. Ü2,3 bağlı sialik asit (Neu5AcÜ2,3Gal?1,4GlcNAc) ile Ü2,6 bağlı sialik asit (Neu5AcÜ2,6Gal/GalNAc) HPO'da gözlenmişken, yalnız Ü2,3 bağlı sialik asit (Neu5AcÜ2,3Gal?1,4GlcNAc) hemolenfte dolaşan farklılaşmış hemositlerde bulunduğu gösterilmiştir. Analitik olarak, hemositlerden asit hidrolizi ile izole edilen sialik asitler DMB (2-diamino-4,5-methylenediaoxy-benzene dihydrochloride) ile türevlendirilerek CapLC-ESIMS/ MS (Kapiller sıvı kromatografisi-elektrosprey iyonizasyon-sıralı kütle spektroskopisi) sistemi ile belirlenmiştir. Sialik asit tiplerinin doğruluğu için, sığır çene altı bezinden izole edilen musin salgısı (birçok sialik asit tiplerini içerir) standart olarak kullanılmıştır. Dokuz farklı sialik asit (Neu5Ac, Neu5,9Ac2, Neu5,7,9Ac3, Neu9Ac5Gc, Neu5,7Ac2, Neu5Gc, Neu7,9Ac25Gc, Neu5,8,9Ac3, Neu5,8Ac2) olgun-farklılaşmış hemositlerde, sekiz tip sialik asit (Neu5Ac, Neu5,9Ac2, Neu5,7,9Ac3, Neu9Ac5Gc, Neu5,7Ac2, Neu5Gc, Neu7,9Ac25Gc, Neu5,8Ac2) HPO'da belirlenmiştir. Dolaşımdaki farklılaşmış hemositlerde miktar bakımından en bol bulunan sialik asit, Neu5Ac ve onun asetillenmiş tipleri Neu5,9Ac2, Neu5,7Ac2 ve Neu5,7,9Ac3'dir. Bu sonuçlar, hemositlerin gelişimi sırasında sialik asidin asetilasyonu, farklılaşmanın yeni bir işaretleyici molekülü olabilirliğini göstermektedir. Ayrıca bu sonuçlar böceklerde sialik asit bulunduğuna dair ek bir kanıt olmuştur.;Sialic Acid, Hematopoietic Organ, Hemocyte, Fluorescent Microscopy, Lectins, CapLC-ESI-MS/MS, Bombyx mori (Lepidoptrea), Insect.;Sialik Asit, Hematopoietik Organ, Hemosit, Floresan Mikroskobu, Lektinler, CapLC-ESI-MS/MS, Bombyx mori (Lepidoptrea), Böcek.