Akciğer kanser hücre modelinde mitokondrialmutant gen ekspresyonlarının susturulmasınınkarsinogenez üzerindeki etkilerinin araştırılması
Küçük Resim Yok
Tarih
2024
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Çalışmamızda, insan küçük hücreli dışı akciğer kanseri hücre hattı A549'da bulunan MT-ND2 m.4587T>C (Phe40Leu) varyantının siRNA transfeksiyonu ile mRNA düzeyinde susturulmasının mitokondriyal fonksiyonlar ve karsinogenez üzerindeki etkilerini araştırmayı amaçladık. Ayrıca, akciğer kanseri gibi ölümcül hastalıklarda mtDNA mutasyonlarının RNA tabanlı terapötik ajanlarla nasıl hedeflenebileceğini anlamayı hedefledik. Bu bağlamda, siRNA transfeksiyonu ile mitokondriyal süreçler deregüle edilerek, hücre proliferasyonu, apoptoz, klonojenik sağkalım ve yara iyileşmesi üzerindeki etkileri çeşitli deneylerle değerlendirildi Akım sitometri analiz bulgularına göre, A549 hücre hattında apoptoz analizlerinde (Annexin V, Kaspaz-3 ve JC-1) zamana bağlı istatistiksel anlamlı değişiklikler gözlemlendi. T2A hücre hattında ise, mitokondriyal membran değişimi üzerinde zamana bağlı etkiler gözlenmemiş, ancak Annexin V ve Kaspaz-3 bulgularına göre özellikle 72. saatte zamana bağlı istatistiksel değişiklikler gözlemlendi Bulgularımız, apoptozla ilgili genler CASP3, CASP7, CASP9 ve BAX genlerinin ekspresyonunda siRNA transfeksiyonunun 72 saatte artışlar gözlemlendi. Diğer taraftan TP53 geninin ekspresyonunda da 72. saatte artışlar gözlendi ve bu artışın MT-ND2 m.4587T>C varyantının hücrelerde tümör supresör etkilerini artırabileceği ve apoptoz yolaklarını etkileyebileceği tahmin edilmektedir. A549 hücre hattında yara iyileşmesi deneyi bulguları analizlerimiz, 0-120 saatlik zaman periyodunda uygulama ve kontrol grupları arasında zamana bağlı istatistiksel anlamlı farklar olduğunu gösterdi. T2A hücrelerinde ise uygulama ve kontrol grupları arasında zamana bağlı istatistiksel anlamlı farklar olduğunu ancak 96 saat sonunda bu etkinin azaldığı gözlemlendi A549 hücre hattında 72 saatlik zaman periyodunda uygulama ve kontrol grupları arasında mitokondriyal fonksiyonlar üzerindeki etkiler ROS üretim analizi ile değerlendirildi ve zamana bağlı belirgin bir değişiklik olmadığı gözlemlendi. Diğer taraftan bulgularımız T2A hücre hattında ise 72 saatlik zaman periyodunda uygulama ve kontrol grupları arasında zamana bağlı istatistiksel anlamlı farklar olduğunu gösterdi. Hücre proliferasyonu ve klonojenik sağkalım üzerinde susturmanın anlamlı bir etkisi saptanmadı Bu çalışma, MT-ND2 m.4587T>C varyantının siRNA ile hedeflenmesinin A549 hücrelerinde etkiler yarattığını, ancak bu tür terapötik yaklaşımların karsinogenez üzerindeki potansiyelini anlamak için daha fazla araştırma yapılması gerektiğini gösterdi. Gelecekte, farklı siRNA formülasyonları ve stratejileriyle bu sonuçların doğrulanması ve mtDNA mutasyonlarının kanser terapilerindeki rolünün daha iyi anlaşılması için kapsamlı çalışmalar yapılması gerekmektedir.
