Kanser terapisi için anti-SUV39H1 siRNA taşıyıcı sistemlerin geliştirilmesi

Basit Öğe Kaydı
dc.contributor.authorKotmakçı, Mustafa
dc.contributor.investigatorÖrs, Hüseyin
dc.date.accessioned2025-06-24T11:14:21Z
dc.date.available2025-06-24T11:14:21Z
dc.date.issued2024
dc.departmentEge Üniversitesi, Eczacılık Fakültesi, Eczacılık Teknolojisi Bölümü, Farmasötik Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
dc.description.abstractKanser, anormal çoğalma özelliğine sahip hücrelerin kontrolsüz bir şekilde büyümesi, normal dokı sınırlarının aşarak yakın dokuları istila etmesi ve/veya diğer organlara yayılmasıyla vücudun hemen hemen her organında veya dokusunda başlayabilen geniş bir hastalık grubudur. siRNA’ların kullanılmasıyla gerçekleştirilen gen susturması, kanser oluşumunu tetikleyen genlerin susturulmasında kullanılarak hastalığın tedavisi için yeni yöntemlerin araştırılmasını mümkün kılmaktadır. Nanoteknolojinin uzun yıllardır ilaç taşınmasına yönelik araştırılmakla birlikte, genetik materyal taşınmasındaki gerçek potansiyeli geçtiğimiz yıllarda piyasaya sürülen oligonükleotid ilaçlarda ve COVID-19 aşılarının bileşiminde taşıyıcı olarak kullanılmalarıyla ortaya konmuştur. iScore Designer web aracı ile siRNA'lar tasarlanmıştır. Katyonik LNP'ler liyofilizasyonrehidrasyon yöntemi ile hazırlanmıştır. siRNA, LNP'ler ile kompleksleştirilmiş ve kompleks oluşumu ile nükleaz stabilitesi jel retardasyon deneyi ile doğrulanmıştır. LNP'ler ve kompleksler boyut ve zeta potansiyeli açısından karakterize edilmiştir. Formülasyonların sitotoksisitesi H1299, HCC827 ve Calu1 hücre hatları üzerinde değerlendirilmiştir. Hücresel internalizasyon Calu1 hücrelerinde gözlemelenmiştir. iScore Designer skorlarına göre en yüksek skora sahip olan iki siRNA adayı seçilmiştir. 62.4 - 87.4 nm parçacık boyutuna ve +30.4 ila +31.7 mV zeta potansiyeline sahip LNP'ler elde edilmiştir. 10'un üzerindeki N/P oranlarında LNP formülasyonlarının siRNA ile kompleks oluşturabildiği gözlemlenmiştir. N/P 10 15 ve 20 oranlarında hazırlanan komplekslerin boyutlarının 100 nm'nin altında olduğu tespit edilmiştir. Artan N/P oranının, komplekslerin anyonik stres direncini artırdığı gözlenmiştir. RNaseA varlığında siRNA %60’ın üzerinde degradasyonudan korunduğu gözlenmiştir. Test edilen hücrelerde LNP’ler ve kompleksler toksisite göstermemiştir. Hücresel alım çalışmalarına göre N/P 15 oranının optimal alım sağladığı tespit edilmiştir. Geliştirilen LNP:siRNA kompleksleri iyi in vitro stabilite, biyouyumluluk ve hücresel alım göstermiştir. Akciğer kanseri hücreleri üzerinde SUV39H1 susturulmasının daha ileri araştırmaları gerekmektedir.
dc.description.abstractCancer is a broad group of diseases characterized by the uncontrolled growth of cells with abnormal proliferative properties. Gene silencing using siRNAs allows for the exploration of new treatment methods by targeting genes that trigger cancer formation. Nanotechnology's potential in genetic material delivery has been recently demonstrated in oligonucleotide drugs and COVID-19 vaccines. siRNAs were designed using the iScore Designer web tool. Cationic LNPs were prepared by lyophilization-rehydration. siRNA was complexed with LNPs, and complex formation and nuclease stability were confirmed by gel retardation assay. LNPs and complexes were characterized by size and zeta potential. Cytotoxicity was evaluated on H1299, HCC827, and Calu1 cell lines. Cellular internalization was observed in Calu1 cells. Two siRNA candidates with the highest iScore Designer scores were selected. LNPs with particle sizes of 62.4 - 87.4 nm and zeta potentials of +30.4 to +31.7 mV were obtained. LNP formulations formed complexes with siRNA at N/P ratios above 10. Complexes prepared at N/P ratios of 10, 15, and 20 had sizes below 100 nm. Increasing N/P ratio increased the complexes' anionic stress resistance. siRNA was protected from degradation above 60% in the presence of RNaseA. LNPs and complexes showed no toxicity in the tested cells. N/P 15 ratio provided optimal cellular uptake. The developed LNP:siRNA complexes show good in vitro stability, biocompatibility, and cellular uptake. Further research on SUV39H1 silencing in lung cancer cells is warranted.
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/11454/117658
dc.language.isotr
dc.publisherEge Üniversitesi
dc.relation.publicationcategoryProject
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/closedAccess
dc.subjectLNP
dc.subjectsiRNA
dc.subjectgen susturma
dc.subjectnükleik asit taşınması.
dc.subjectgene silencing
dc.subjectnucleic acid delivery.
dc.subject.classification32149
dc.titleKanser terapisi için anti-SUV39H1 siRNA taşıyıcı sistemlerin geliştirilmesi
dc.typeProject

Dosyalar

Lisans paketi
Listeleniyor 1 - 1 / 1
Küçük Resim Yok
İsim:
license.txt
Boyut:
1.17 KB
Biçim:
Item-specific license agreed upon to submission
Açıklama:
İndir

Koleksiyon

Araştırma Projeleri Koleksiyonu