Akut lenfoblastik lösemi ve kronik lenfositik lösemi hücre serilerinde kemoterapötik ajan "Rituximab" kullanımının JAK-STAT ve NF-mB sinyal yolakları üzerindeki etkilerinin belirlenmesi
Yükleniyor...
Tarih
2014
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Kronik lenfositik lösemi (KLL) daha çok yetişkinlerde ve akut lenfoblastik lösemi (ALL) de çoğunlukla çocuklarda görülen önemli iki lösemi tipidir. Her iki hastalığın gelişiminde JAK-STAT ve NF-mB gibi sinyal yolaklarındaki düzensizliklerin etkili olabileceği bilinmektedir. Günümüzde lösemi tedavisi ağırlıklı olarak kemoterapi ile sağlanmaktadır. Ancak, son yıllarda tedavi rejimlerine monoklonal antikorların eklenmesi ile yeni tedavi seçenekleri oluşturulabilmiştir. Şimerik bir anti-CD20 antikoru olan Rituximab kanser tedavisinde kullanılmak üzere lisans alan ilk monoklonal antikordur ve günümüzde B-KLL gibi B-hücre malignite tedavilerinde kullanılmaktadır. Ancak, B-ALL hastalığının tedavisinde henüz aktif olarak kullanılmaya başlanılmamıştır. Çalışmadaki amacımız, Rituximab' ın özellikle çocukluk çağı B-ALL' deki etkisini; aynı zamanda, JAK-STAT ve NF-mB sinyal yolakları üzerinden B-ALL ve B-KLL' deki etki mekanizmalarını araştırmaktı. Çalışmamızda, Rituximab' ın KLL' ye model oluşturan EHEB ve ALL' ye model oluşturan TANOUE hücre serilerindeki sitotoksik etkisi MTT testi ile, apoptotik etkisi de Annexin V metodu ile değerlendirilmiştir. Ayrıca, Rituximab' ın ilgili hücre serilerindeki STAT3 ve RelA ile hedef genlerinin mRNA ekspresyonlarına etkisi kantitatif RT-PCR ile rölatif olarak belirlenmiştir. Rituximab ile muamele sonrası STAT3 ve RelA protein ekspresyonlarındaki değişimler ise Western Blot' un ardından alkalen fosfataz yöntemiyle kromojenik olarak saptanmıştır. Rituximab' ın EHEB ve TANOUE hücre serileri üzerinde sitotoksik bir etkisi olmadığı belirlenmiş ve kompleman aracılı sitotoksisitenin de sadece EHEB hücre serisinde oluştuğu saptanmıştır. Bununla birlikte, Rituximab' ın her iki hücre serisinde apoptotik bir etkisinin bulunmadığı da görülmüştür. Rituximab ile muamele sonrasında her iki hücre serisinde STAT3 ve RelA' nın değişik saatlerde mRNA ve protein ekspresyon düzeylerinde bir azalmaya neden olduğu saptanmıştır. STAT3 gen ekspresyonunun EHEB hücre serisinde 6. saatte 4.2, TANOUE hücre serisinde de 3. saatte 2.7- kat azaldığı belirlenmiştir (p = 0.00). RelA gen ekspresyonunun ise EHEB hücre serisinde 6. saatte 4.5, TANOUE hücre serisinde de 12. saatte 3.34 - kat azaldığı saptanmıştır (p = 0.00). Ayrıca, JAK-STAT ve NF-mB sinyal yolaklarının hedef genleri arasında yer alan PTGS2, MYC, ICAM1, CCND1 ve BIRC5 ekspresyonlarının EHEB hücre serisinde sırasıyla 1.5 (p = 0.0076), 1.61 (p = 0.00022), 9.3 (p = 0.028), 1.67 (p = 0.046), 1.54 (p = 0.028) - kat; yine ICAM1 ve BIRC5 ekspresyonlarının TANOUE hücre serisinde sırasıyla 2.29 (p = 0.000012), 1.76 (p = 0.017) - kat azaldıkları belirlenmiştir. Sonuç olarak, Rituximab kullanımının KLL' nin yanında pediatrik B-ALL' de de etkin olabileceği ve farklı kemoterapötik ajanlarla kombinasyonlarının B-ALL tedavisindeki rolünü daha iyi ortaya çıkaracağı kanısındayız.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
ALL, KLL, Rituximab, STAT3, RelA., ALL, CLL, Rituximab, STAT3, RelA., Tıbbi Biyoloji A.B.D.
