Alfa-D-galaktosidaz enziminin izolasyonu ve karakterizasyonu

dc.contributor.advisorTelefoncu, Azmi
dc.contributor.authorAlpat, Şenol
dc.date.accessioned2024-08-19T19:29:16Z
dc.date.available2024-08-19T19:29:16Z
dc.date.issued1990
dc.departmentEge Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya Ana Bilim Dalıen_US
dc.descriptionBu tezin, veri tabanı üzerinden yayınlanma izni bulunmamaktadır. Yayınlanma izni olmayan tezlerin basılı kopyalarına Üniversite kütüphaneniz aracılığıyla (TÜBESS üzerinden) erişebilirsiniz.en_US
dc.description.abstractÖZET Çeşitli organizmaların << -D-galaktosidaz enzimi içerdiği uzun yıllardan beri bilinmektedir. c< -D-galaktosidaz enzimi, son yıllarda özellikle şeker endüstrisi için kullanılması düşünülen bir enzimdir. Bu sebeple OC -D-galaktosidazin uygun bir kaynaktan ekonomik bir biçimde izolasyon ve saflaştırılması büyük bir önem tanımaktadır. Bu çalınmada Laktobaci1lus brevis mikroorganizmalarından OC -D-galaktosidaz izole edildi ve elde edilen preparatın karakterizasyonu üzerinde çalışıldı. Çeşitli izolasyon ve saflaştırma tekniklerinin incelenmesi, optimum pH ve optimum tem- peratür tesbiti ve safsızlık yaratan unsurların uzaklaştırılması gibi bir seri çalışma yapıldı. Söz konusu çalınmalardan elde edilen verilerin değerlendirilmesiyle yüksek aktiviteye sahip çözünür oC -D-galaktosidaz preparatı elde edilmiştir, öncelikle fermantasyon süresi, ası oranı ve ortamın seker içeriğinin tesbiti üzerinde duruldu. Yapılan çalışmalar sonucunda melas içeren ortamda % 2 ası oranı ile Eh saatlik fermantasyon sonucu en yüksek aktivite elde edildi. Büyük çaplı fermantasyon yukarıdaki sonuçlara göre yapıldı. Fermantas yon sonunda hücreler 3000 g'de 15 dakika santr ifüjlenerek ayrıldı ve % 0,85 lik tuz çözeltisi ile yıkandı. Daha sonra Sû dakika sonikasyona maruz bırakılarak hücreler parçalandı. Bu hücre kalıntıları 1S000 g'de 25 dakika santr if üj lenerek ayrıldı. Bu işlemden sonra Extrat V. 70 lik doygun <1MH ) SO ile <+ 2 t* çöktürüldü ve saf suya karsı diyaliz lendi. Takibeden işlemde, çözeltideki proteinlerin uzaklaştırılması amacıyla DEAE-Sephadex kolonundan (2,2x13 cm) yararlanıldı. Kolon 0,01 M-0,025 M--41- 0,05 M-0,1 M pH:7 olan fosfat tamponu ile protein absorbansı gözlenmeyinceye kadar yıkandı. Bu absorbanlar 280 nm ' de ölçüldü. Sonuçta üç ayrı protein fraksiyonunun varlığı tesbit edildi. En yüksek enüimatik aktiviteye sahip fraksiyon suya karşı diyalizlendi. Bu işlemlerin sonunda çözünür &?* -D-galak tosidaz elde edildi. SDS muamelesi ile kağıt elektroforezi uygulandı. Bu işlem sonucu proteinin alt birim içermediği ve iki fraksiyonun elek troforetik mobilite değerlerininde birbirine yakın olduğu o gözlendi. Optimum pH 5.5-6.0 aralısında (37 O optimum temperatürde 35-4-0 C aralısında (pH:5,8) bulunmuş olup sonuçlar literatürdeki verilere uyumluduren_US
dc.description.abstract-42- SUMMARY It has been known for a long time that microorganisms contain ç>(. -D-galactos idase. C\ -D-galactosidase enzyme is a fundamental material for sugar industry during recent years. Because of this reason it is very important that the isolationen_US
dc.identifier.endpage49en_US
dc.identifier.startpage1en_US
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/11454/83386
dc.identifier.yoktezid10287en_US
dc.language.isotren_US
dc.publisherEge Üniversitesien_US
dc.relation.publicationcategoryTezen_US
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/closedAccessen_US
dc.subjectBiyokimyaen_US
dc.subjectBiochemistryen_US
dc.subjectEnzimleren_US
dc.subjectEnzymesen_US
dc.subjectGalaktosidazlaren_US
dc.subjectGalactosidasesen_US
dc.subjectLactobacillusen_US
dc.subjectLactobacillusen_US
dc.subjectŞeker endüstrisien_US
dc.subjectSugar industryen_US
dc.titleAlfa-D-galaktosidaz enziminin izolasyonu ve karakterizasyonuen_US
dc.typeMaster Thesisen_US

Dosyalar