Alfa-D-galaktosidaz enziminin izolasyonu ve karakterizasyonu
dc.contributor.advisor | Telefoncu, Azmi | |
dc.contributor.author | Alpat, Şenol | |
dc.date.accessioned | 2024-08-19T19:29:16Z | |
dc.date.available | 2024-08-19T19:29:16Z | |
dc.date.issued | 1990 | |
dc.department | Ege Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya Ana Bilim Dalı | en_US |
dc.description | Bu tezin, veri tabanı üzerinden yayınlanma izni bulunmamaktadır. Yayınlanma izni olmayan tezlerin basılı kopyalarına Üniversite kütüphaneniz aracılığıyla (TÜBESS üzerinden) erişebilirsiniz. | en_US |
dc.description.abstract | ÖZET Çeşitli organizmaların << -D-galaktosidaz enzimi içerdiği uzun yıllardan beri bilinmektedir. c< -D-galaktosidaz enzimi, son yıllarda özellikle şeker endüstrisi için kullanılması düşünülen bir enzimdir. Bu sebeple OC -D-galaktosidazin uygun bir kaynaktan ekonomik bir biçimde izolasyon ve saflaştırılması büyük bir önem tanımaktadır. Bu çalınmada Laktobaci1lus brevis mikroorganizmalarından OC -D-galaktosidaz izole edildi ve elde edilen preparatın karakterizasyonu üzerinde çalışıldı. Çeşitli izolasyon ve saflaştırma tekniklerinin incelenmesi, optimum pH ve optimum tem- peratür tesbiti ve safsızlık yaratan unsurların uzaklaştırılması gibi bir seri çalışma yapıldı. Söz konusu çalınmalardan elde edilen verilerin değerlendirilmesiyle yüksek aktiviteye sahip çözünür oC -D-galaktosidaz preparatı elde edilmiştir, öncelikle fermantasyon süresi, ası oranı ve ortamın seker içeriğinin tesbiti üzerinde duruldu. Yapılan çalışmalar sonucunda melas içeren ortamda % 2 ası oranı ile Eh saatlik fermantasyon sonucu en yüksek aktivite elde edildi. Büyük çaplı fermantasyon yukarıdaki sonuçlara göre yapıldı. Fermantas yon sonunda hücreler 3000 g'de 15 dakika santr ifüjlenerek ayrıldı ve % 0,85 lik tuz çözeltisi ile yıkandı. Daha sonra Sû dakika sonikasyona maruz bırakılarak hücreler parçalandı. Bu hücre kalıntıları 1S000 g'de 25 dakika santr if üj lenerek ayrıldı. Bu işlemden sonra Extrat V. 70 lik doygun <1MH ) SO ile <+ 2 t* çöktürüldü ve saf suya karsı diyaliz lendi. Takibeden işlemde, çözeltideki proteinlerin uzaklaştırılması amacıyla DEAE-Sephadex kolonundan (2,2x13 cm) yararlanıldı. Kolon 0,01 M-0,025 M--41- 0,05 M-0,1 M pH:7 olan fosfat tamponu ile protein absorbansı gözlenmeyinceye kadar yıkandı. Bu absorbanlar 280 nm ' de ölçüldü. Sonuçta üç ayrı protein fraksiyonunun varlığı tesbit edildi. En yüksek enüimatik aktiviteye sahip fraksiyon suya karşı diyalizlendi. Bu işlemlerin sonunda çözünür &?* -D-galak tosidaz elde edildi. SDS muamelesi ile kağıt elektroforezi uygulandı. Bu işlem sonucu proteinin alt birim içermediği ve iki fraksiyonun elek troforetik mobilite değerlerininde birbirine yakın olduğu o gözlendi. Optimum pH 5.5-6.0 aralısında (37 O optimum temperatürde 35-4-0 C aralısında (pH:5,8) bulunmuş olup sonuçlar literatürdeki verilere uyumludur | en_US |
dc.description.abstract | -42- SUMMARY It has been known for a long time that microorganisms contain ç>(. -D-galactos idase. C\ -D-galactosidase enzyme is a fundamental material for sugar industry during recent years. Because of this reason it is very important that the isolation | en_US |
dc.identifier.endpage | 49 | en_US |
dc.identifier.startpage | 1 | en_US |
dc.identifier.uri | https://hdl.handle.net/11454/83386 | |
dc.identifier.yoktezid | 10287 | en_US |
dc.language.iso | tr | en_US |
dc.publisher | Ege Üniversitesi | en_US |
dc.relation.publicationcategory | Tez | en_US |
dc.rights | info:eu-repo/semantics/closedAccess | en_US |
dc.subject | Biyokimya | en_US |
dc.subject | Biochemistry | en_US |
dc.subject | Enzimler | en_US |
dc.subject | Enzymes | en_US |
dc.subject | Galaktosidazlar | en_US |
dc.subject | Galactosidases | en_US |
dc.subject | Lactobacillus | en_US |
dc.subject | Lactobacillus | en_US |
dc.subject | Şeker endüstrisi | en_US |
dc.subject | Sugar industry | en_US |
dc.title | Alfa-D-galaktosidaz enziminin izolasyonu ve karakterizasyonu | en_US |
dc.type | Master Thesis | en_US |