İmmobilize Phanerochaete chrysosporium'dan mangan peroksidaz enziminin üretimi, izolasyonu ve kısmi saflaştırılması
Yükleniyor...
Tarih
2003
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Phanerochaete chrysosporium BKMF-1767 (ATCC 24725) farkli tasiyicilarda immobilize edildi. En iyi tasiyici polistiren köpük ve optimum immobilizasyon kosullari 50 rpm, 37oC ve 2 saat olarak belirlendi. Adsorpsiyon kinetik sabitleri saptandi. Sonuçlar; polistiren köpük üzerinde P. chrysosporium adsorpsiyonunun Langmuir adsorpsiyon izotermini izledigini gösterdi. P. chrysosporium kati- hal kültürlerinde mangan peroksidaz (MnP) enziminin üretimine etki eden bazi faktörler incelendi. Kültürlere 37oC ve pH 4,5 da 174 mM Mn+2, % 0,05 Tween 80 (v/v), 22 mM azot ve 10 g/L glukozun ilavesiyle maksimum MnP aktivitesi (421 U/L) elde edildi. Modifiye kati-hal daldirmali biyoreaktörde kesikli tip kültivasyonda P. chrysosporium tarafindan MnP üretimi gerçeklestirildi ve maksimum MnP aktivitesi 770,82 U/L olarak saptandi. Enzim üretim verimliligi 110,12 U/gün.L olarak belirlendi. MnP, immobilize P. chrysosporiumʼdan izole edildi ve (NH4)2SO4 ile protein çöktürmesinin ardindan DEAE-Sefaroz iyon degisim ve Ultrajel AcA 54 jel flitrasyon kromatografileriyle saflastirildi. Bu saflastirma prosesiyle 5,8-saflastirma katiyla % 23,08 verim elde edildi. Jel fitrasyon ve sodyum dodesil sülfat poliakrilamid jel elektroforezine (SDSPAGE) göre; enzimin molekül agirligi 45000 ±1000 Da dur. Saflastirilan MnP nin optimum pH si 4,5, sicakligi da 30oC olarak saptandi. Bazi inhibitör ve aktivatörlerin enzim aktivitesine etkisi incelendi.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Phanerochaete chrysosporium, kati-hal kültürleri, polistiren köpük, mangan peroksidaz, saflastirma, karakterizasyon, modifiye daldirmali biyoreaktör, kesikli tip kültivasyon., Phanerochaete chrysosporium , solid-state cultures, polystyrene foam, manganese peroxidase, purification, characterization, modified immersion bioreactor, batch made cultivation., Biyokimya A.B.D.
