STAMP gen ailesinin normal prostat ve prostat kanser gelişiminde apoptoz yolaklarına olan etkilerinin araştırılması

Prostat kanseri günümüzde Batı dünyasında en sık olarak tedavi edilen ve erkek nüfusun kansere bagımlı ölümlerine ikinci öncelik eden sebeptir. Hastalıgın baslangıç döneminde tümör büyümesi androjene bagımlı olarak ortaya çıkar ve halen kullanılmakta olan androjen ablasyon tedavisinin temelini olusturur (HUGGINS, 1941). Bununla birlikte, birçok vakada prostat kanseri androjene bagımsız bir fenotiple geri döner (rekurans) ve bilinen basarılı bir tedavisi yoktur (CRAWFORD,1999). Bu nedenle çalısmalar AR ile regüle olan ve prostata özgül genler tanımlanmasını amaçlamaktadır. lginç bir örnek olarak, STAMP gen ailesinden STAMP1/STEAP2 (KORKMAZ, 2002) ve STAMP2/STEAP4 (KORKMAZ, 2005) genleri sadece AR pozitif hücrelerde eksprese olurlar, AR' ın STAMP gen ailesinin ekspresyonundaki rolü önemli bir sorudur. Metastatik prostat kanser örneklerinde yüksek oranda eksprese olan STEAP (six transmembrane epithelial antigen of prostate) (HUBERT, 1999), C-terminalinde altı transmembran domain içeren ailenin ilk örnegidir. STAMP/STEAP ailesi genlerin de prostatın normal ve patofizyolojisinde benzer fonksiyonlardaki rolleri ile yer alabilecegi öne sürülebilir. Çalısmamızda STAMP genlerinin ifade etmeyen prostat kanser hücre hatları olan DU145 ve PC3' e tranzin transfeksiyon ile kazandırılmalarını takiben tripan mavisi sayımı ile büyüme kinetikleri saptanmıstır ve HisMax-STAMP1 transfeksiyonu DU145 hücrelerinde HisMax-vektör transfeksiyonu ile benzer bir tablo çizerken, PC3 hücrelerinde sadece 10.günde artan bir proliferasyon saptandı. HisMax-STAMP2 transfekte her iki hücre hattı da HisMax-vektör transfekte hücrelere kıyasla artma yönünde egilim gösterdi. STAMP2 geninin kazanılmıs kararlı ekspresyon (stabil) hücre hatları DU145 ve PC3 hücrelerinde Zeosin ilavesi ile olusturulmustur. LNCaP hücrelerinde yapılan total antioksidan aktivite ölçüm deneyleri ile her iki STAMP geninin kazandırılması (over-ekspresyonu) sonucu apoptoz uyarısı karsısında antioksidan kapasitede artıs saptadık. STAMP genlerinin ekspresyonu olan LNCaP hücrelerinde siRNA teknolojisinin kullanımı ile karsılastırmalı olarak proapoptotik ve/veya anti-apoptotik molekülleri içeren apoptoz panelinde RT-PCR ile ve Annexin-V ile akıs sitometrisinde incelenmistir. STAMP1'in p53, Bcl2, kaspaz 7 ve 9 proteinleri üzerinde göreceli baskılayıcı bir etki olusturdugunu saptadık. STAMP gen ailesinin promotor bölgeleri analiz edilmis ve STAMP2'de putatif androjen cevap elementlerinin (ARE) varlıgı kromatin immunopresipitasyon metodu ile dogrulanmıstır, -/+ sentetik androjen-R1881 indüksiyonu sonrası aynı panelde degerlendirilmistir. Bu arastırma projesi ile prostata özgü STAMP gen ailesi ve etkiledigi p53 ve kaspaz iliskili yolaklar karakterize edilmistir ve gelecekteki çalısmalarımıza ısık tutacaktır.;Prostat Kanseri, STAMP, apoptoz ve gen susturma-siRNA teknolojisi.;Prostate Cancer, STAMP, apoptosis, and gene silencing-siRNA technology.