Mirosinaz enziminin Capparis ovata bitkisinden saflaştırılması ve moleküler düzeyde karakterizasyonu

Bitkilerdeki ilginç ve önemli savunma sistemlerinden biri olan glikosinolat-mirosinaz sistemi son yıllarda üzerinde yoğun araştırmalar yapılan bir konudur. Ülkemizde doğal yayılış gösteren Capparis ovata bitkisinde glikosinolat-mirosinaz sisteminin ve mirosinaz enziminin varlığı ile glikosinolat içeriği bir önceki çalışmamızda belirlenmiştir. Bu projemizde mirosinaz enziminin Capparis bitkisinden saflaştırılması ve detaylı olarak karakterizasyonu amaçlandı. Bu bağlamda, Capparis ovata tohumlarından mirosinaz enziminin ConA afinitite kromatografisi yöntemi ile saflaştırılması, askorbik asit ile etkileşimlerinin saptanması ve farklı pH değerlerinde enzim aktivitesindeki değişimlerin belirlenmesi, mirosinaz enzimin 3D7 ve 34:14 antikorları ile etkileşimlerinin saptanması ve TGG1 ile RT-PCR yoluyla amplifikasyonu gerçekleştirildi. Glikosinolat-mirosinaz sisteminin bileşenleri insan sağlığı, kanser araştırmaları ve patojenlerle biyolojik mücadele gibi çeşitli uygulama alanlarında kullanılmaktadır. Projemiz kapsamında Capparis mirosinaz enziminin birçok biyokimyasal özelliği hakkında önemli bilgilere ulaştık. Literatürde daha önceden farklı bitkilerde tanımlanmış mirosinaz enzimlerine benzerliklerini ve farklılıklarını açıklamaya çalıştık. Capparis mirosinazının temel aktivite seviyesinin son derece yüksek olması ve askorbik asit ile etkileşiminin çok farklılık göstermesi ilgi çekici bulgularımız arasındadır. Bu değerler Arabidopsis thaliana ve Brassica türlerinden elde edilen sonuçlardan belirgin farklılık göstermektedir.;Caper, thioglucoside glucohydrolyase, glucosinolate-myrosinase system.;Kebere, tiyoglukosid glukohidrolaz, glikosinolat-mirosinaz sistemi.