Boldin'in SH-SY5Y hücrelerinde rotenon toksisitesine karşı koruyucu etkisinin araştırılması
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2023
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
İnsan ömrünün uzamasıyla paralel olarak nörodejeneratif hastalıkların görülme sıklığı artmıştır. Dünya'da 50 milyon kişinin nörodejeneratif hastalıklardan muzdarip olduğu ve 2050 yılına kadar bu rakamın 115 milyon kişiye çıkacağı tahmin edilmektedir. Bu hastalıklardan biri olan Parkinson hastalığı Dünya genelinde 10 milyondan fazla kişiyi etkileyen, Alzheimer hastalığından sonra ikinci en sık görülen nörodejeneratif hastalıktır. Beyinde substansiya nigra bölgesinde bulunan dopaminerjik nöronların hasarı ve kaybı sonucu, striatumda dopamin eksikliği ile birlikte gelişen, tremor, bradikinezi, rijidite ve postural instabilite ile seyreden kronik ve ilerleyici bir hastalıktır. Hastalığın etiyopatogenezi tam olarak çözülememiş olsa da literatürdeki çalışmalar, yaşlanma, genetik faktörler, gibi etkenlere ve pestisitler, ağır metaller gibi çevresel toksinlerin yarattığı nörotoksisiteye işaret etmektedir. Mevcut veriler, PH'nin önlenmesinin veya erken tedavisinin en etkili terapötik strateji olabileceğini düşündürmektedir. Bu nedenle hastalığın etyopatogenezini aydınlatmak ve yeni tedavi stratejileri geliştirmek amacıyla in vivo ve in vitro deneysel Parkinson modelleri oluşturulmaktadır. Bu modellerden biri de rotenon toksisitesi modelidir. Rotenon sıklıkla hayvan ve hücre çalışmalarında deneysel Parkinson modeli oluşturmak için kullanılmakta olan organik bir pestisittir. Mitokondrideki elektron taşıma sistemi Kompleks 1 inhibisyonu yoluyla oksidatif stresi arttırır. Hücre ve hayvanlarda Parkinson hastalığı benzeri etkiler oluşturur. Bu tez çalışmasında insan nöroblastom hücre hattı SH-SY5Y hücrelerinde in vitro Parkinson modeli oluşturmak için organik bir pestisit olan rotenon ile toksisite oluşturulmuştur. Flavonoidler, E ve C vitaminleri gibi çeşitli antioksidanların Parkinson hastalığına ve rotenon toksisitesine karşı koruyucu olduğu literatürde bildirilmiştir. Çalışmamızda Latin Amerika geleneksel tıbbında karaciğer ve sindirim sistemi bozukluklarının tedavisinde kullanılan bir alkaloit olan ve güçlü antioksidan ve antiinflamatuar etkileri olduğu bildirilen boldin'in nöroprotektif etkisinin araştırılması amaçlanmıştır. Çalışmada rotenonun öldürücü dozunu (LD50) bulmak için SH-SY5Y hücrelerine 24 saat boyunca artan dozlarda rotenon uygulanmıştır. MTS testi ile, 24 saat boyunca 200 nM rotenona maruz bırakılan gruptaki hücre sayısının, tedavi edilmeyen kontrol grubuna göre yaklaşık yarısı kadar azaldığı belirlenmiştir. Boldin'in koruyucu etkinliğini belirlemek için SH-SY5Y hücre gruplarına 2 saat boyunca çeşitli dozlarda boldin ön tedavisi uygulanmış ve boldin ön muamelesinden sonra 24 saat boyunca 200 nM rotenona maruz kalan gruplarda hücre sağkalımı MTS testi ile değerlendirilmiştir. Hücrelerin koloni oluşturma kapasitesini değerlendirmek için klonojenik test uygulanmıştır. Apototik hücre ölümünü saptamak için ELİSA yöntemi ile aktif kaspaz 3 düzeyleri belirlenmiştir ve hoechst boyama yapılmıştır. Çalışmamızın sonucunda elde edilen bulgular rotenonun SH-SY5Y hücrelerinde nörotoksik olduğunu ve apoptotik hücre ölümünü indüklediğini göstermiştir. Test sonuçları, düşük dozlarda boldin'in rotenon kaynaklı toksisiteye karşı hücre sağkalımını artırarak nöroprotektif bir etkiye sahip olduğunu ve bu artışın boldin'in antiapoptotik aktivitesinden kaynaklanabileceğini ortaya koymuştur. Ek olarak, düşük dozlarda boldin'in hücre çoğalmasını ve koloni oluşturma potansiyelini de desteklediğini göstermiştir.;Rotenon; nörotoksisite; nörodejenerasyon; boldin; Parkinson hastalığı.;Rotenone; neurotoxicity; neurodegeneration; boldin; Parkinson's disease.
Açıklama
Tıp Fakültesi, Fizyoloji A.B.D. Araştırma Projesi
Araştırma Projesi elektronik ortamda bulunmaktadır.
Araştırma Projesi elektronik ortamda bulunmaktadır.
