Bir grup antioksidan bileşiğin tayini için HPLC yöntemi geliştirilmesi ve çoklu dedektör analitik yöntem validasyonu çalışmaları
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2010
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Bir grup antioksidan karotenoid bilesigin (alfatokoferol, beta karoten, astaksantin, retionik asit ve likopen) es zamanlı tayini için seri baglı DAD ve ECD dedektör kullanımına dayalı izokratik bir YBSK yöntemi gelistirilerek yöntem geçerliligi çalısmaları yapılmıstır. Yöntem geçerliligi çalısmalarında International Conference of Harmonization (ICH) tüzel kisiligi tarafından 1999 tarihinde yayınlamıs ve 2005 yılında ICH Q2(R1) adıyla güncellenen analitik yöntem geçerliligi kılavuzu baz alınmıstır. Alıkonma zamanları ilgili bilesikler için sırasıyla 15,6 dakika, 38,9 dakika, 6,1 dakika ve 5,79 dakika olarak saptanmıstır. Likopen için ilgili temel enstrümental analiz verisi elde edilmekle birlikte YBSK verileri eldeki standardın bozunması nedeniyle elde edilememistir. Belirleme sınırı (LOD) ve tayin sınırı (LOQ) her bilesik için DAD baz alındıgında sırasıyla 0,79, 0,04, 0,01, 0,01 ve 0,49, 0,12, 0,01, 0,05 olarak saptanmıstır. ECD baz alındıgında ise ICH Q2(R1) uygunluk kriteri (S/G oranı LOD için en az 2/1 veya 3/1, LOQ için ise en az 10/1) saglanmadıgından hesaplanmamıstır. ICH Q2(R1) kılavuzunda yer alan özgüllük (specificity), dogrusallık (linearity), dogruluk (accuracy), kesinlik (precision), belirleme sınırı (limit of detection - LOD), tayin sınırı (limit of quantification - LOQ) parametreleri ve sistem uygunluk testlerine (system suitability tests) ait veriler elde edilmis ve sunulmustur. lgili herbir parametre için elde edilen verilerin kabul kriterlerine uygunlugu gösterilmistir. Dolayısıyla tanımlanan yöntemin alfatokoferol, beta karoten, astaksantin, retionik asit ve likopenin ECD ve DAD kullanılarak es zamanlı tayini için geçerli oldugu bulunmustur. Gerçek örnek olarak müstahsarlarla yapılan YBSK tayinlerinde sadece alfa tokoferol ve beta karoten içeren örnek saglanabildigi için alfa tokoferol için 20 ppm ve beta karoten için 15 ppm optimum derisim degerleri olarak belirlenmistir. Buna göre alfa tokoferol ve beta karoten içeren örneklerde final konsantrasyon degeri sırasıyla 20 ve 15 ppm olacak sekilde yeterli düzeyde standart ilavesi, ekstraksiyon öncesi, yapılmıstır. Takiben yapılan ekstraksiyon sonucu elde edilen verimler baz alındıgında en yüksek verimin (büyükten küçüge) A-OD, Alaska, AOC ve Multivitamin Plus müstahsarlarıyla elde edildigi görülmüstür. lgili müstahsar örneklerinin %geri kazanımları sırasıyla %99, %89, %85 ve %79 seklindedir. Alaska müstahsarında beta karoten ve A-OO müstahsarın da ise alfa tokoferol tespit edilememistir.
Açıklama
Araştırma Projesi -- Ege Üniversitesi, 2010
