Gürsel, DeryaAslan, AslıSönmez, CemileKoturoğlu, GüldaneÇöplü, NilayKurugöl, Nuri ZaferAydemir, Şöhret2020-12-012020-12-0120120374-9096https://app.trdizin.gov.tr//makale/TVRReE1UTTJOZz09https://hdl.handle.net/11454/65041Boğmaca, Bordetella pertussis’in neden olduğu, tüm yaş gruplarını etkileyen, bulaşıcı bir solunum sistemi enfeksiyonudur. Özellikle yenidoğan ve bebeklerde yüksek morbidite ve mortaliteye yol açar. Ergen ve erişkinlerde atipik ve ılımlı seyreden hastalığa çoğu zaman tanı konulamamakta; bu hastalar duyarlı bebek ve çocuklara bulaşmada önemli bir kaynak oluşturmaktadır. Bu nedenle iki haftadan daha uzun süren öksürük semptomu olan çocuk ve ergenlerde B.pertussis enfeksiyonunun laboratuvar incelemeleriyle araştırılması önerilmektedir. Bu çalışmada, uzamış öksürüğü olan çocuk yaş grubu hastalarda kültür, gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (Rt-PCR) ve serolojik yöntemler ile B.pertussis enfeksiyonunun araştırılması amaçlanmıştır. Çalışmaya, Ege Üniversitesi Tıp Fakültesi Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Anabi- lim Dalı Genel Pediatri Polikliniğine Aralık 2009-Ağustos 2010 tarihleri arasında başvuran, uzamış (? 14 gün) öksürüğü olan 2 ay-14 yaş (ortanca: 7.0) arasındaki 51 (19 kız, 32 erkek) hasta dahil edilmiştir. Olguların 48 (%94)’i yaşına uygun olarak aşı şeması uygulanan, üçü ise boğmaca aşısı yapılmamış hastalar olup, 38 (%75) olgunun başvuru öncesinde antibiyotik kullandığı belirlenmiştir. Hastalardan alınan na-zofarengeal sürüntü örneklerinde B.pertussis araştırılması için kültür (%7 at kanı ve kömür içeren Bordeella Agar; Becton Dickinson, Almanya) ve IS 481 gen bölgesinin hedeflendiği Rt-PCR (Roche Applied Science, Almanya) yöntemleri uygulanmıştır. Ayrıca 2-4 hafta arayla elde edilen iki serum örneğinde anti- pertussis toksin (anti-PT) IgG ve antifilamentöz hemaglutinin (anti-FHA) IgG düzeylerinin ölçüldüğü “in- house” ELISA çalışılmış; antikor titresinde dört kat artış veya tek serum örneğinde 100 EU/ml’nin üzerindeki anti-PT IgG titreleri B.pertussis enfeksiyonunun serolojik kanıtı olarak kabul edilmiştir. Çalışmaya alınan 51 hastadan birinin nazofarengeal sürüntü kültüründe B.pertussis üremiş; 6 (%11.8) hastanın nazofarengeal sürüntü örneğinde IS 481 Rt-PCR testi ile pozitiflik saptanmış ve 9 (%17.6) olgu serolojik testlerle B.pertussis enfeksiyonu olarak değerlendirilmiştir. Buna göre toplam 12 hastada en az bir yöntemle pozitif sonuç alınmış; bu hastalardan birinde her üç yöntemle, ikisinde IS481 Rt-PCR ve serolojik testlerle, üçünde sadece IS 481 Rt-PCR ile, altısında ise sadece serolojik testlerle tanı konulmuştur. Dolayısıyla çalış- mamızda, uzamış öksürüğü olan çocukların %23.5 (12/51)’inde B.pertussis enfeksiyonu tespit edilmiştir. Bu olguların (5 kız, 7 erkek) yaş aralığı 2 ay-11 yıl arasında olup, biri aşılanmamış, dördü aşı şeması tamamlanmamış hastalardır. Sonuç olarak, uzamış öksürüğü olan çocuklarda B.pertussis varlığının araştırılmasında kültür, PCR ve serolojik testlerin kullanılması gerektiği ve bu alanda standardize edilmiş testlere ihtiyaç olduğu sonucuna varılmıştı.Pertussis is a respiratory infection caused by Bordetella pertussis. It attacks all age groups. It has significantly higher mortality and morbidity among newborns and children. Adolescents and adults with symptomatic but unrecognized pertussis are often the source of the infection for pediatric cases. Therefore, it is suggested to perform laboratory diagnostic tests for B.pertussis infection in children and adolescents with prolonged cough of more than two weeks. in this study, it was aimed to identify B.pertussis infection by culture, real-time polymerase chain reaction (Rt-PCR) and serological methods among children with prolonged cough. Nasopharyngeal swab samples were obtained from 51 children (19 female, 32 male; age between 2 months-14 years; median age: 7.0), who attended the outpatient clinic of Ege University Medical Faculty Department of Pediatrics, Izmir, Turkey with prolonged cough (≥ 14 days) during December 2009-August 2010. While pertussis vaccination had been completed in 48 (94%) of the cases, three cases had not been vaccinated. Previous antibiotic treatment was reported for 38 (75%) of the cases. Cultivation was done by using 7% horse blood and charcoal containing Bordetella Agar (Becton Dickinson, Germany) and Rt-PCR targeting IS481 sequence (Roche Applied Science, Germany) was used to detect B.pertussis. in addition, in house ELISA was performed to detect titers of anti-pertussis toxin (anti-PT) IgG and anti-filamentous hemagglutinin (anti-FHA) IgG antibodies in paired sera collected in 2-4 week intervals. Fourfold titer increase of antibodies or anti-PT IgG levels of at least 100 EU/ml in one serum were evaluated as serological confirmation of B.pertussis infection. in our study, B.pertussis was isolated from one nasopharyngeal swab samples culture among the 51 patients, and IS 481 Rt-PCR yielded positive results for B.pertussisin 6 (11.8%) samples. Nine (17.6%) patients were diagnosed as B.pertussis infection by serological tests. Totally 12 patients were evaluated as positive using at least one method. Among them only one had positive results with three of the tests used and two were positive with IS 481 Rt-PCR assay and serologic tests. Three patients were found positive with only IS 481 Rt-PCR and six were identified only with serologic diagnosis. in this study, 23.5% (12/51) of child- ren with persistant cough were evaluated as having B.pertussis infection. the age range of these cases(5 female, 7 male) was 2 months-11 years and one case had not been vaccinated at all while four cases had not completed the vaccination schedule. It was concluded that since B.pertussis can be detected as the etiologic agent of persistant cough in a significant number of children by culture, PCR and serologic tests, diagnostic tests must be applied to evaluate B.pertussis infection. However, standardized sero- logical methods and PCR protocols are needed for accurate and reliable diagnosis.trinfo:eu-repo/semantics/openAccessMikrobiyolojiArticle462211224