Kronik miyeloid lösemi tedavisinde Ruxolitinibin in vitro uygulanması ile meydana gelen moleküler biyolojik değişikliklerin incelenmesi

Autophagy, Chronic Myeloid Leukemia, Ruxolitinib.;Hematopoietik kök hücrenin klonal bir hastalığı olan kronik miyeloid lösemi (KML) (9;22) trasnslokasyonu sonucu BCR-ABL füzyon proteininin aşırı ifadesi ile karakterizedir. JAK 1 ve 2 inhibitörü Ruxolitinib, miyeloflbroz tedavisine karşı geliştirilen ilk ajandır. Apoptoz ve otofaji mekanizmaları önemli protein kaskadlarını düzenleyerek hücre yaşamını ya da ölümünü belirler. Kanserlerde apoptotik ve otofajik etkinliğin arttırılması güncel bir terapötik hedeftir. Çalışmamızda K-562 insan KML hücreleri ve NCI-BL 2171 insan normal B lenfositleri üzerine ruxolitinibin uygulanması sonucu meydana gelen sitotoksik, apoptotik ve otofajik değişikliklerin ve ilişkili genlerin ifadelerindeki değişimlerin kontrol grubuyla karşılaştırılarak belirlenmesi amaçlanmıştır. Hücrelerde ruxolitinibin sitotoksik etkisi WST-1 analizi ile zaman ve doza bağımlı olarak değerlendirilmiş, hücrelerden total RNA izolasyonu ve cDNA sentezi gerçekleştirilmiştir. Apoptotik etki JC-1 ve Annexin V metotlarıyla belirlenmiş, gen ifadelerindeki değişiklikler RT-qPCR ile değerlendirilmiştir. Ruxolitinibin IC50 dozu K-562 ve NCI-BL 2171 hücreleri için sırasıyla 201.ıM ve 23,6gM olarak belirlenmiştir. Ruxolitinib hücreler üzerinde apoptotik etkiye neden olmamakla birlikte K-562 ve NCI-BL 2171 hücrelerinde sırasıyla 2,01 ve 1.79 kat otofaj iyi indüklemiştir. Ruxolitinibin mTOR, AKT ve STAT gibi otofaji inhibitörlerinin ekspresyon seviyelerini azaltarak hücre ölümünü gerçekleştirdiğini düşünmekteyiz. Ruxolitinibin BCR-ABL tirozin kinazının aşağı-akış yönündeki hedeflerinden JAK/STAT yolağını bloklayarak KML' de potansiyel bir tedavi yöntemi olacağı düşünülmekle birlikte otofajiyle ilgili herhangi bir çalışma yapılmamıştır. Ruxolitinibin moleküler mekanizmaları aydınlatılarak KML tedavisinde otofaji indüksüyonu aracılığıyla yeni bir bakış açısı oluşturacağını düşünmekteyiz.;Otofaji, Kronik Miyeloid Lösemi, Ruxolitinib.