Çeşitli kaynaklardan izole edilen Bacillus Sp. izolatlarının kitosanaz aktivitesinin ve antifungal etkisinin belirlenmesi
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2008
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Bacillus spp. tarafından üretilen küf hücre duvarını parçalayan kitosanaz gibi hidrolitik enzimler ve birçok antifungal antibiyotik, toprak kaynaklı fungal hastalıklara karşı antagonistik etki sağlamaktadır. Çalışmamızda incir ve çekirdeksiz üzümlerde özellikle hasat öncesi periyotta mikotoksin oluşumunun azaltılmasında biyokontrol amaçlı strateji geliştirmek için kitosanaz aktivitesi yüksek olan Bacillus izolatlarının belirlenmesi amaçlanmıştır. Çalışmamızda çeşitli kaynaklardan yapılan izolasyon çalışmaları sonunda 508 tane Bacillus izolatı elde edilmiştir.“Soluble Chitosanase Detection Agar (SCDA)”da yapılan tarama çalışmaları sonucunda sadece 184 tanesinde (% 36) kitosanaz aktivitesi belirlenmiş ve bunların enzimatik indeks değerleri hesaplanmıştır. Kitosanaz aktivitesi ile enzimatik indeks değerine göre seçilen toplam 18 Bacillus izolatının Aspergillus niger EGE-KL-213, Aspergillus foetidus EGE-KL-211, Aspergillus ochraceus EGE-K-217 ve Fusarium solani KCTC 6328 test küflerine karşı antagonistik özellikleri incelenmiş ve hepsinde antagonistik aktivite saptanmıştır. Daha sonra potansiyel biyokontrol ajanı olan bu izolatların Kitosanaz Ortamı II’de maksimum kitosanaz (0,84 U/ml-11,60U/ml), kitinaz (0,84-2,88 U/ml), n-asetil-β- heksoamidaz (0,97-5,98 U/ml) ve proteaz (1,64-92,42U/ml) enzim aktiviteleri ile toplam protein (0,059-0,117mg/ml) miktarları saptanmıştır. 18 potansiyel biyokontrol ajanı Bacillus izolatının kitosanaz aktivitesinin en yüksek olduğu saatten alınan fermentasyon sıvılarının Aspergillus niger’in spor çimlenmesine ve biyokütle gelişimine karşı 12 saat sonundaki etkileri incelenmiştir. Fermentasyon sıvılarının A.niger’in spor çimlenmesinde meydana getirdikleri azalma oranları % 14,7 ile % 61,6 arasında buna karşılık biyokütle üretiminin azalma oranları ise % 10,9 ile % 30,4 arasında belirlenmiştir. Yapılan çeşitli invitro denemeler sonucunda; potansiyel biyokontrol ajanı olarak belirlenmiş 18 tane Bacillus izolatının arasından kitosanaz enzim aktivitesi ve kitosanaz enzim stabilitesi, kitinaz, n-asetil-β-hexoaminidaz, proteaz enzim aktiviteleri, toplam protein miktarı ve bu Bacillus izolatlarının her birinin fermentasyon sıvısının Aspergillus niger EGE-KL-213 küfünün spor çimlenmesi ve biyokütle miktarında meydana getirdiği indirgenme oranları ile yayılma hızına göre en etkin 5 tanesi (Bacillus sp. EGE.B.6.1m, Bacillus sp. EGE.B.4.2i; Bacillus sp. EGE.B.1.23, Bacillus sp. EGE.B.8.1m, Bacillus sp. EGE.B.19.3) belirlenmiştir.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Antagonistik etki, Biyokontrol, Bacillus spp., Kitosanaz., Antagonistic effect, Biocontrol, Bacillus spp., Chitosanase., Biyoteknoloji A.B.D.
