Bazı Centiyane (Gentiana spp.) türlerinde Agrobacterium rhizogenes aracılığı ile transforme saçaklı kök kültürlerinin oluşturulması ve sekonder metabolit içeriklerinin belirlenmesi
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2009
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Genellikle dağlık bölgelerde yetişen Gentiana bitkisinin kurutulmuş kök ve rizomları, halk hekimliğinde ilaç olarak kullanılmaktadır. Kökleri, sekoiridoid glikozitlerce zengin olan Gentiana türlerinin sindirim sistemini uyarıcı ve sedatif etkileri vardır. Araştırmada, saçaklı kök kültürleri, Gentiana cruciata L. türünde in vitro koşullarda üretilen üç farklı klona ait yaprak ve internod eksplantlarının A4, 15834, R1000 ve 8196 adlı yabani tipteki dört Agrobacterium rhizogenes ırkı kullanılarak enfekte edilmeleri ile oluşturulmuşlardır. Ko-kültivasyon ortamı olarak 50 μM AS (Asetosiringon), içeren yarı- MS (Murashige ve Skoog, 1962) tuzları ile B5 vitaminlerinden oluşan hormonsuz besin ortamı kullanılmıştır. Saçaklı kök oluşum oranları, internod eksplantlarında %5.6-%33.3 arasında, yaprak eksplantlarında ise %0.0-%6.7 arasında değişim göstermiştir. Bu saçaklı kökler, daha sonra sıvı ortamlara aktarılmışlardır. Saçaklı kök büyütülmesi için kullanılan 3 besin ortamı içinde yarı-MS tuzları ile B5 vitaminlerinden oluşan besin ortamının en uygun ortam olduğu belirlenmiştir. Saçaklı köklerin trasformasyonları, PCR ile doğrulanmıştır. Bu araştırmada, oniki saçaklı kök hattı elde edilmiştir ve bunların sekonder metabolit içerikleri HPLC analizleri ile belirlenmiştir. Kantitatif sonuçlar, tüm kök örneklerinde gentiopikrozitin en fazla bulunan madde olduğunu göstermiştir. Ayrıca örneklerde loganik asit, svertiamarin ve sverozit metabolitleri belirlenmiş ve miktarları saptanmıştır.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Gentiana, Saçaklı kök, Agrobacterium rhizogenes, Sekonder metabolit, Gentiana, Hairy root, Agrobacterium rhizogenes, Secondary metabolite, Biyoteknoloji A.B.D.
