Her2 ve Epcam eksprese eden hücreler ile 3 boyutlu agresif meme kanseri tümör modeli geliştirilmesi

Meme kanseri, dünyanın her yerinde, kadınlar arasında en sık görülen önemli sağlık sorunlarından biridir. Kanserin erken teşhisi, bu hastalıktan ölüm riskini büyük ölçüde düşürmektedir ve hastalarda gizli ve dolaşımdaki tümör hücreleri (DTH) üzerine yapılan araştırmalar kanserin erken teşhisindeki önemi nedeniyle sıklık kazanmıştır. Bu çalışmanın amacı meme kanserinde DTH olarak tanımlanan EpCAM ve Her2 pozitif alt popülasyonun hücre hattından izolasyonunun gerçekleştirilmesi, bu hücrelerin karakterizasyonunun yapılması ve in vivo tümör yapısını geleneksel 2 boyutlu (2B) kültürlere göre daha iyi ifade eden üç boyutlu 3B kültürde değerlendirilmesidir. Bu çalışmada, DTH modeli olarak MDA-MB 453 meme kanseri hücre hattı kullanılmıştır ve EpCAM(+), Her2(+) ve EpCAM(+)/Her2(+) EpCAM(+) manyetik aktive hücre ayrımı (MACS) ile hücre alt popülasyonları izole edilmiştir. Bu hücre alt gruplarının karakterizasyonu için hücre büyüme ve tutunma karakterleri, mikro doku ve sfer oluşturma kabiliyetleri incelenmiştir. 3B model olarak; kitosan doku iskeleleri üzerinde hücre kültivasyonu yapılmıştır. Hücrelerin 3B morfolojileri SEM (Scanning Electron Microscopy) tekniği ile görüntülenmiştir. 2B ve 3B kültivasyon metotları ile kültive edilen hücreler, kültivasyon sonrasında hücre özelliklerinin değerlendirilebilmesi için pluripotensi belirteci olan Sox2, Oct-3/4, Nanog ve Nestin ekspresyonu açısından kantitatif PZR (polimer zincir reaksiyonu) ile analiz edilmiştir. Ayrıca bu hücreler Oct-3/4, Sox-2, Her2, EpCAM ve Cxcr-2 belirteçleri açısından immünohistokimya analizleri gerçekleştirilmiştir. Son aşamada ise kemoterapotik bir ajan olarak meme kanserinde kullanılan doksorubisine karşı oluşacak tepki oluşturulan 3B ve 2-B sistemlerde karşılaştırmalı olarak incelenmiştir. Sonuç olarak, DTH'lerin özelliklerinin incelenebileceği, proliferasyon hızı yüksek, tutunma eğilimi düşük, pluripotensi genlerini eksprese eden, ilaç direçliliği yüksek hücrelerden oluşan agresif bir tümör modeli oluşturulmuştur.;Meme kanseri, DTH (Dolaşımdaki Tümör Hücreleri), EpCAM, Her2.;Breast cancer, CTC (Circulating tumor cells), EpCAM, Her2.