Kronik myelositer lösemi hücre modeli K-562 üzerinde Sunitinib'in sitotoksik ve apoptotik etkilerinin değerlendirilerek lökomogenezde etkili olabilecek genlerin ekspresyon profillerinin çıkartılması
Küçük Resim Yok
Dosyalar
Tarih
2015
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Sunitinib, Chronic Myeloid Leukemia, Apoptosis.;Kronik Myelositer Lösemi (KML) patolojisinde %90'ın üzerinde Phledelphia (Ph) kromozomu saptanmaktadır. Bu genin neden olduğu bcr/abl proteini yüksek tirozin kinaz aktivitesine sahiptir. KML tedavisi için çeşitli tirozin kinaz inhibitörleri geliştirilmiştir ancak bu ajanlara direnç gelişimi de söz konusudur. Sunitinib esas olarak renal hücreli karsinom tedavisinde kullanılan bir tirozin kinaz inhibitörüdür. Sunitinib VEGF ve PDGF ile indüklenen endotelyal hücre proliferasyonu ve anjiogenezi inhibe etmektedir, ancak diğer sinyal yolakları üzerindeki etkisi bilinmemektedir. Çalışmamızda, sunitinib'in KML hücre modeli K-562 üzerindeki sitotoksik ve apoptotik etkisinin JAK-STAT sinyal ileti yolağı elemanları, tümor süpresör genler ve onkogenler, hematopoez ilişkili genler, hücre siklusu ve VEGF yolağı elemanlarının mRNA seviyesindeki ekspresyon değişimleri üzerine etkisinin araştırılması hedeflenmiştir. Sunitinib'in sitotoksik efektif dozu IC50 değeri tripan mavisi ve WST-1 hücre proliferasyon analizi testi ile belirlendi. Hedef genlerin ekspresyon seviyeleri sunitinib uygulamasını takiben eş zamanlı olarak qRT-PCR ile saptanmıştır. Protein ekspresyon analizleri `WesternBreeze Chromogenic Kit-Anti-Rabbit' kitin uygulama esaslarına dayanarak western blot analizi ile belirlenmiştir. istatistik analizler GraphPad Prism metodu ile anlamlılık düzeyi p<0.05 kullanılarak değerlendirilmiştir. Sunitinib'in IC50 dozu, 48. saat için 34.5 nM olarak belirlenmiştir. Sunitinib muamelesi sonrasında hücrelerin apoptotik durumu "Cell Death Detection kit" ve "Caspase 3 Activity Assay kit" ile belirlendi. Çalışmamız; sunitinibin, KML tedavisinde onkogenleri inhibe ederek, hücre siklus düzenleyici genler ile birlikte tümör supresör genlerini aktive ederek teröpatik cevabı artırabilecek yeni bir terapötik ajan olduğunu desteklemektedir.;Sunitinib, Kronik Myeloid Lösemi, Apoptoz.
Açıklama
Araştırmacılar; Filiz Vural, Buket Kosova, Fahri Şahin, Burçin Kaymaz Tezcanlı, Ajda Ersoy Güneş, Asu Fergün Yılmaz, Nur Akad Soyer
Araştırma Projesi -- Ege Üniversitesi, 2015
Araştırma Projesi -- Ege Üniversitesi, 2015
