Thioridazine molekülünün meme kanseri kök hücrelerindeki sitotoksik etkisinin moleküler düzeyde aydınlatılması ve Wnt yolağı üzerindeki etkilerinin araştırılması

Thioridazine, Brest Cancer, Wnt, CREB.;Thioridazine, Meme kanseri, Wnt, CREB.;Yaygın olarak, antipsikotik olarak kullanılan Thioridazine'in birçok kanser hücre hattında antiproliferative etkiye sahip olduğu bilinmektedir. Meme kanseri kök hücre kültürlerinde ve heterojen yapıdaki meme kanseri hücre kültürlerinde Wnt sinyal yolağı önemli bir role sahiptir. Thioridazine Wnt'te görev alan moleküller üzerinde ne gibi etkiye sahiptir sorusunun cevabı aranmıştır. Çalışmada kullanılan MDA-MB-231, CD44+/CD24-, kök hücre olmayan kanser hücreleri ve MCF-10A, Thioridazine'in artan konsantrasyonlarıyla (1-30 gM), 12, 24, 48, 72 saatlik zaman dilimlerinde muamele edildi. XTT tabanlı canlılık testi kullanılarak, sitotoksisite yüzdeleri hesaplandı. Thioridazine'nin hücre içi alımının Dopamin 2 reseptörleri üzerinden gerçekleştiği hipotezi dikkate alınarak, çalışılan hücrelerdeki reseptör miktarı ELISA yöntemi ile belirlendi. Thioridazine (THZ) ilacının dopamin sinyal yolağını kullanıp, kullanmadığmı translasyonel düzeyde de doğrulamak amacıyla, bu yolağın aşağısında rol alan fosfo-CREB molekülünün ekspresyon miktarına WB yöntemi ile bakıldı. Thioridazine kaynaklı sitotoksisitede Wnt/13-katenin sinyal yolağının rolünün aydınlatılması için apoptozisde rol oynayan ve Wnt ailesinin üyesi olan Wnt-1 molekülünün her iki hücre hattındaki bazal ekspresyonu Western blot yöntemi ile belirlendi. MDA-MB-231 ve CD44+/CD24-, hücrelerinde Thioridazine' in erken dönemde (24. saat) etkili olduğu gösterildi. Bu süreye ait IC50 değerleri sırasıyla, 18.1 p.M ve 9 1.1M olarak hesaplandı. Dopamin 2 reseptörünün bazal miktarı, CD44+/CD24- için 868.5 ng/mL, MDA-MB-231 için 1115.4 ng/mL olarak tespit edildi. Thioridazine'in artan konsantrasyonlarına bağlı olarak dopamin 2 reseptör miktarında azalma gözlendi.