β-galaktozidaz aktivitesinin belirlenmesinde biyosensör temelli ölçüm sistemlerinin geliştirilmesi
Yükleniyor...
Tarih
2007
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
β-galaktozidaz, β-galaktozidleri monosakkaritlerine hidrolizini katalizleyen hidrolaz sınıfı bir enzimdir. β-galaktozidazın farklı substratları arasında, gangliozid GM1, laktozil seramidleri, laktoz ve değişik glikoproteinler bulunmaktadır. β-galaktozidaz için alternatif bir isim olarak laktaz kullanılabilir. β-galaktozidazın aktif merkezi substratı olan disakkariti, “sığ” ve “derin” bağlama modlarında iki farklı yolla hidrolizleyebilir. K+ ve Mg+2 iyonları enzimin optimum aktivite gösterebilmesi için gerekli iyonlardır. Substrattaki β-bağı, bir glutamik asit yan zincirindeki uç karboksil grubu tarafından parçalanır. β-galaktozidaz insan metabolizması için gerekli bir enzimdir. İnsan metabolizmasındaki noksanlığı, galaktosialidosis veya Morquio sendromuna sebebiyet verir. E.coli’de β-galaktozidaz lac Z genindeki lac operonun aktivasyonu sayesinde sentezlenir. Laktoz ile ilgili problemler β-galaktozidaz üretimine bağlı olarak 3 temel alanda karşımıza çıkmaktadır. Bunlar sağlık, gıda teknolojisi ve çevredir. Sağlık ile ilgili alanda, laktoz, yetersiz bağırsak β-galaktozidazı sentezi durumunda sorun yaratmaktadır. Yetersiz β-galaktozidaz varlığında laktozun aşırısı kana geçer sonra da idrarla atılır. Ancak bu döngü esnasında kalın bağırsakta çeşitli rahatsızlıklar meydana gelir. Bu tezde, β-galaktozidazın aktivitesinin belirlenebilmesi için 3 farklı biyosensör geliştirildi. Bütün biyosensörler için ayrıntılı optimizasyon çalışmaları yapıldı. Optimizasyon çalışmalarından sonra 3 biyosensörün karakterizasyon çalışmaları detaylı bir şekilde tamamlandı. Farklı kaynaklardan elde edilen β-galaktozidazlar için geliştirilen biyosensörlerle elde edilen yanıtlar incelendi. Son olarak, yapay ince bağırsak sıvısında β-galaktozidaz aktivitesi tayin edildi ve ede edilen sonuçlar bir spektrofotometrik referans metodla elde edilen yanıtlarla kıyaslandı.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
β-galaktozidaz, biyosensor, β-galaktozidaz aktivitesi tayini, laktoz, GM1-ganliozidozis, laktoz intoleransı., β-galactosidase, biosensor, β-galactosidase activity determination, lactose, GM1-ganliosidosis, lactose intolerancy., Biyokimya A.B.D.
