Bazı katekolaminlerin tayinlerine yönelik farklı immobilizasyon tekniklerine dayalı bikrobiyal biyosensör sistemleri geliştirilmesi

Aspergillus niger, carbon paste electrode, biosensor.;Aspergillus niger, karbon pasta elektrot, biyosensör.;Bu projede katekolaminlerin tayini için mikroorganizma esaslı yeni bir biyosensör geliştirilmesi amaçlandı. Bu amaçla Aspergillus niger'ın liyofilize formu karbon pasta elektrotta immobilize edildi. Katekolaminlerin -0.8 ve 1.0 V potansiyel aralığındaki akım farklanma değişimleri, çoklu katmalı amperometrik yöntem kullanılarak tayin edilmiştir. Tasarlanan biyosensör sistemiyle katekolaminlerin ölçümleri 0,5 V (L-dopa), 0,55 V( dopamin) ve 0.6 V(Epinefrin ) ta amperometrik metotla yapılmıştır. Katekolaminlerin konsantrasyonuyla doğru orantılı olarak artan akım değerlerinden çıkılarak tayin yapılmıştır. Hazırlanan biyosensörün optimizasyon çalışmalarında öncelikle optimum aspergillus niger miktarı parametresi çalışıldı. Çalışma koşullarının optimizasyonunda pH optimizasyonu ve sıcaklık optimizasyonu gerçekleştirildi. Daha sonra karakterizasyon çalışmalarında katekolainler için doğrusal tayin aralığı, tekrarlanabilirlik, substrat spesifikliği, girişim etkisi ve depo kararlılığı gibi parametreler araştırılmıştır. Optimizasyon çalışmaları sonucunda katekolamin biyosensörü için en uygun, aspergilllus niger miktarı 3 mg/ml bulunmuştur. Çalışma koşullarının optimizasyonu amacıyla yapılan denemelerde katekolamin biyosensörü için çalışma tamponu olarak 50 mM pH:4.5 asetat tamponu ve çalışma sıcaklığı olarak 35oC bulunmuştur. Tasarlanan biyosensör için yapılan karakterizasyon çalışmalarında ise 10-100 M aralığında dopamin, epinefrin ve dopa için doğrusal sonuçların alındığı belirlenmiştir. Tekrarlanabilirlik denemelerinde dopamin (n=5) 50 æM dopamin konsantrasyonunda ortalama değer x- = 49.27 æM, standart sapma (S.S) = ± 1,91 oM ve % varyasyon katsayısı (V.K) = % 3,87 olarak bulunmuştur. Tekrarlanabilirlik denemelerinde epinefrin (n=5) 50 æM epinefrin konsantrasyonunda ortalama değer x-= 51,44 M, standart sapma (S.S) = ± 1,69oM ve % varyasyon katsayısı (V.K) = %3,28 olarak bulunmuştur. Tekrarlanabilirlik denemelerinde dopa (n=6) 50 æM dopa konsantrasyonunda ortalama değer x- = 49,55 æM, standart sapma (S.S) = ± 1,19 oM ve % varyasyon katsayısı (V.K) = % 2,40 olarak bulunmuştur.