Alcaligenes latus phbCAB (poli-3-hidroksibütirikasit biyosentez) genleri klonlanmış Escherichia coli'de PHB üretimi ve izolasyonu
Küçük Resim Yok
Tarih
2012
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/closedAccess
Özet
Polihidroksialkanoatlar (PHA), sahip oldukları fiziksel ve kimyasal özelliklerin yanı sıra biyouyumlu ve biyobozunur olmaları sebebiyle petrol bazlı plastiklerin alternatifi olabilecek potansiyele sahiptir. PHA biyopolimerleri besin açısından dengesiz koşullarda birçok gram (+) ve gram (-) bakteri tarafından sentezlenirler ve hücre içerisinde enerji depo materyali olarak biriktirilmektedir. Polihidroksibütirik asit (P3HB) en çok çalışılan ve bilinen PHA çeşididir. Bu tez çalışmasında endüstriyel PHB üretiminde kullanılan Alcaligenes latus DSM 1124 ırkında yer alan PHB biyosentez genlerinin Escherichia coli'ye aktarılarak yüksek miktarda PHB üretimi ve üretilen biyopolimerin izolasyonu hedeflenmiştir. Bu amaçla PZR yöntemi ile çoğaltılan Alcaligenes latus DSM 1124 ırkında yer alan PHB biyosentez genleri pSP 72, pUC 19 ve pQE 40 plazmitlerine başarılı bir şekilde aktarılmıştır. Elde edilen rekombinant plazmitler 10 farklı E. coli ırkına aktarılarak PHB üretimi için en uygun olan ırk ve plazmit olarak pQEAL1124 plazmitini taşıyan E. coli Rosetta ırkı belirlenmiştir. Uygun ırk belirlendikten sonra PHB üretiminin arttırılması amacıyla besiyeri, karbon kaynağı, sıcaklık, karıştırma hızı gibi optimizasyon çalışmaları gerçekleştirilerek %60'ın üzerinde verim elde edilmiştir.;Polihidroksibütürik asit, biyobozunur polimerler, Alcaligenes latus, E. coli.;Polyhydroxybutyrate, biodegradable polymers, Alcaligenes latus, E. coli.
Açıklama
Araştırma Projesi -- Ege Üniversitesi, 2012