İnsan hepatosellüler karsinom (HCC) hücre hattında (HEPG2) wingless INT-1 (WNT) sinyal yolunun aktivasyonu ve farmakolojik modulasyonu
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2023
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Kanser, canlı organizmasının temel yapı taşları olan hücrelerin yakalandığı bir hastalıktır ve onlarca farklı kanser türü mevcuttur. Hepatosellüler karsinom (HCC) dünya çapında en yaygın olan ve en sık görülen karaciğer kanser türüdür. Yapılan bu çalışmada, insan HCC (HEPG2) hücre hattında Wnt yolağının aktivasyonu, gen ekspresyonu uyarılmış ve Wnt ligand uyarısı sonrası sinyal iletim yolağında yer alan anahtar proteinlerden Dishevelled1 (Dvl1) ve Frizzled7 (Fzd7) proteinlerini kodlayan genlerin ekspresyonu değerlendirilmiştir. Ayrıca bu hücre modelinde Wnt yolağının ekspresyon düzeylerine ucuz ve kolay ulaşılabilen kimyasallardan salisilik asit ve vitamin D moleküllerinin farmakolojik modülasyonu da araştırılmıştır. HCC (HEPG2) hücre hattı ticari olarak temin edilmiştir. Yapılacak çalışmanın gerektirdiği doğrultuda, HCC hücreleri yeterli sayıya ulaşıncaya kadar özel besiyeri içerisinde 370C'de inkübe edilmiştir. Canlılık analizleri ışık mikroskobu kullanılarak ve hücre sayımı yapılarak belirlenmiştir. HCC (HEPG2) hücreleri için Salisilik asit IC50 dozu (24. Ve 48. Saat) 45 ?M, Dvit-3 IC50 dozu (24. Ve 48. saat) 30 ?M olarak hesaplanmıştır. Bu çalışmada karsinogenezi direkt ya da dolaylı yoldan tetikleyen Dvl1 ve Fzd7 genlerinin ekspresyon düzeyleri incelenmiştir. Bu bağlamda HEPG2 hepatosellüler karsinoma hücre hattından RNA mini kit ile RNA ekspresyonu yapıldı. Alınan RNA örneklerinden cDNA elde edildi. Dvl1 ve Fzd7 genleri için Taqman hazır primerler ısmarlandı. Her gen için elde olunan karışımlar Taqman 2x RT-PCR kullanılarak ABI7000 RT PCR cihazına yüklendi. House keeping gen ACTB kullanıldı. Ekspresyon değerlerinin karşılaştırılması için ct değerleri alındı. Elde edilen sonuçlara göre, 24 saatlik Dvit-3 in-vitro tedavisinde Dvl1 geninin ekspresyonunda bir azalma gözlemlenmiştir. Aynı zamanda salisilik asit ve salisilik asit+ Dvit-3 in-vitro tedavisinde DVL1 gen ekspresyonunun kontrol grupları ile benzer değerlere sahip olduğu ortaya konuldu. 24 saat sonunda Fzd7 gen ekspresyonunun, salisilik asit ve Dvit-3 in-vitro tedavisinde benzer değerlere sahip olup (p=0.999), kontrol grubundan anlamlı derecede düşük olduğu gözlemlenmiştir. Yine salisilik asit+ Dvit-3 in-vitro tedavisindeki değişim diğer gruplara yakın geri dönüş göstermiştir. 48 saatlik uygulama sonunda Dvl1 ve Fzd7 gen ekspresyonlarında kontrol grubu hücrelerine göre azalma saptanmıştır. Dvit-3, salisilik asit ve salisilik asit+ Dvit-3 in-vitro tedavisinde Dvl1 ekspresyon değerleri deney gruplarında istatiksel olarak farklılık göstermedi, fakat kontrol gruplarından anlamlı derecede düşük oldukları gözlemlendi. Aynı şekilde 48 saatlik muameleden sonra in-vitro tedavi sonucunda Fzd7 gen ekspresyonunun deney gruplarında daha düşük ortalamaya sahip olduğu saptanmıştır. Yapılan tetkikler ve elde edilen sonuçlara göre, Dvl1 ve ayı zamanda Fzd7 gen ekspresyon değerleri deney gruplarında azaldığı gözlemlenmiştir.;Kanser, Hepatosellüler Karsinom (HCC), Wnt sinyal yolağı, Dishevelled (Dvl), Frizzled (FZD).;Cancer, Hepatocellular Carsinoma(HCC), Wnt signal pathway, Dishevelled (Dvl), Frizzled (FZD).
Açıklama
Tıp Fakültesi, Dahili Tıp Bilimleri A.B.D. Araştırma Projesi
Araştırma Projesi elektronik ortamda bulunmaktadır.
Araştırma Projesi elektronik ortamda bulunmaktadır.
