Enzim-mikroorganizma hibrit sistemine dayalı nanomateryal modifiye yeni bir biyosensör sistemi geliştirilmesi ve sükroz tayinine adaptasyonu
Küçük Resim Yok
Tarih
2024
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Sükrozun seçici, duyarlı ve spesifik tayini için enzim-mikroorganizma hibrit sistemine dayalı yeni bir biyosensör sistemi geliştirilmiştir. Bu çalışmada mikroorganizma olarak Saccharomyces cerevisiae ile invertaz enzimi karbon pasta elektrotuna immobilize edildi. Elektrotun yüzey modifikasyonu için nano materyallerden altın nanopartikül (AuNP) kullanılmıştır. İmmobilizasyon aşamaları CV ile karakterize edilmiştir. Sükroz tayinine yönelik biyosensörle alınan ölçümlerde amperometrik metod kullanıldı. Bu metod ile optimizasyon ve karakterizasyon çalışmaları yapılmıştır. Hibrit biyosensörünün amperometrik çalışma potansiyeli 0,5 V olarak tespit edildi. Hibrit biyosensörün çalışma koşulları, pH:7,0 50 mM fosfat tampon ve optimum sıcaklık 35°C olarak bulunmuştur. İnvertaz enzim aktivitesi ve S.cerevisiae miktarına bakılarak hibrit biyosensör üzerindeki etkisi gözlemlendi. Bu çalışmada geliştirilen hibrit biyosensörün doğrusal tayin aralığı (0,1-5,0 µM) olarak belirlenmiştir. Sükroz tayinine yönelik hibrit biyosensörün tayin limiti (LOD) 0,08 µM ve tayin sınırıda (LOQ) 0,25 µM olarak bulunmuştur. Tekrarlanabilirlik denemeleri kapsamında 2 µM sükroz konsantrasyonu ile yapılan ölçümlerde (n=5) ortalama değer (x̄) 1,81 µM, standart sapma (S.S. ±) ±0,09 µM ve % varyasyon katsayısı (% V.K.) % 4,93 olarak belirlenmiştir. Hibrit biyosensörün substrat spesifikliği ile girişim etkisine de bakılmıştır. Biyosensöre yönelik depo kararlılığı denemeleri yapılmıştır. Son olarak sükroz tayinine yönelik olarak geliştirilen hibrit biyosensör ile meyve suyu örneklerinde sükroz tayinleri gerçekleştirilmiştir. Sonuç olarak, sükrozun seçici ve spesifik tayini için invertaz-S.cerevisiae temelli yeni bir hibrit biyosensör oluşturularak, sükrozun tayin metodlarına yeni ve orijinal bir bakış açısı getirilmiştir. Bu çalışma, ileride yapılacak özellikte hibrit tarzı biyosensör çalışmalarına referans olarak, bu alanda bilimsel katkılar sunacaktır.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
İnvertaz, hibrit, biyosensör, sükroz, Saccharomyces cerevisiae., Invertase, hybrid, biosensor, sucrose
