Alkol tayinine yönelik biyosensör geliştirilmesi
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2002
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Etanol, sanayinin hemen her dalında geniş bir kullanım alanına sahip olan ve bunun yanısıra özellikle alkollü içeceklerin günümüzde yaygın kullanımı nedeniyle, adli tıp ve klinik toksikoloji laboratuarlarında tayinine ihtiyaç duyulan toksit bir maddedir. Kromatografi, enzimatik-spektrofotometrik ve kimyasal sensör sistemleri ile etanol tayinleri yapılmakla birlikte bu yöntemlerin bazısı zaman alıcı, bazısı spesifiklikten uzak ve bazısı da oldukça pahalı ekipmanlara ihtiyaç göstermektedir. Biyosensörler, enzim, hücre, doku gibi biyolojik unsurların uygun bir iletim sistemiyle birleştirilmesiyle oluşan biyoanalitik cihazlardır. Biyosensörlerin, tayin edilecek maddeler için ekonomik, pratik ve spesifik ölçümlere imkan vermesi diğer yöntemlere olan en önemli avantajlarıdır. Bu çalışmada, alkol tayini için alkol oksidaz (EC 1.1.3.13) ve katalaz (EC 1.11.1.6) temelli enzim biyosensörleri ile C. Tropicalis maya hücrelerinin kullanıldığı mikrobiyal biyosensörler geliştirilmiştir. Bu amaç doğrultusunda enzim ve hücreler immobilizasyon materyali olarak jelatin, Ca-aljinat ve k-kettajenan ve çapraz bağlayıcı reaktif olarak glutaraldehid kullanılarak çözünmüş oksijen probu membranı yüzeyinde immobilize edildi. Ölçümler, etanol konsantrasyon ile doğru orantılı olarak tüketilen oksijenin belirlenmesiyle elde edilene standart grafikler yardımıyla gerçekleştirildi. Geliştirilen biyosensörlerle oldukça duyarlı ve tekrarlanabilirliği yüksek sonuçlar alındı. Biyosensörlerin optimizasyonu ve karakterizasyonu amacıyla, pH, sıcaklık, tampon sistemi, substrat spesifikliği, tekrarlanabilirlik, termal ve operasyonel kararlılık gibi parametreler incelendi. Herbir biyosensörle etanol için (n=10) ölçüm yapılarak biyosensörlerin standart sapma ve varyasyon katsayıları da hesaplandı. Çalışmanın son kısmında, jeletin tabanlı alkol oksidaz biyosensörü ile bira örneklerinde etanol tayini gerçekleştirilerek, elde edilen sonuçlar enzimatik-spektrofotometrik yöntemle elde edilen verilerle kıyaslandı.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Etanol, biyosensörü mikrobiyal biyosensör, alkol oksidaz, katalaz, C. Tropicalis., Ethanol, biosensor, microbial sensor, alcohol oxidase, catalase, C. tropcalis., Biyokimya Anabilim Dalı