Androjen duyarlı ve kastrasyona dirençli prostat kanseri hücre serilerinde androjen reseptörünü hedef alan miRNA' nın belirlenmesi ile hedef aldığı diğer genlerle gelişen direnç mekanizmasının incelenmesi
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2013
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Prostat kanserli olgularda androjen reseptör (AR) sinyalleşmesi; hücre yaşamı, canlılığı, proliferasyonu, apoptoz ve anjiyogenezin uyarılması gibi temel biyolojik olaylar üzerinde etkili olmaktadır. Androjen ablasyon tedavilerine dirençli prostat kanseri hücre serilerinde, AR ekspresyonunun aşağı regülasyonu, hücre proliferasyonunu inhibe ettiğinin anlaşılması; kastrasyona dirençli prostat kanseri (KDPK) hücrelerinin çoğalmasında AR' nin büyük bir etkisi olduğunun kanıtı olmuştur. Günümüzde AR düzenleme mekanizmasına odaklanıp, AR' yi baskılamak için daha etkin stratejiler belirlemeye çalışılmakta ve prostat kanseri hastaları için yeni tedavi seçenekleri araştırılmaktadır. Ancak, KDPK için henüz etkin bir tedavi şekli bulunamamıştır. Bu sebeple, prostat kanseri hücrelerindeki direnç gelişimi mekanizması altında yatan moleküler değişikliklerin kapsamlı bir şekilde araştırılması gerekmektedir. Bugüne kadar AR mRNA ekspresyonunu hedef alan çok sayıda ve çeşitli küçük sentetik moleküler inhibitörler geliştirilmiştir. Bunlardan biri de miRNA' lardır. Çalışmamızda AR' yi hedef alan olası miRNA' lar in silico analiz ile belirlenmiştir. Bu miRNA' ların LNCaP, LNCaP-Abl ve LNCaP-104R2 prostat kanseri hücre serilerindeki ekspresyon profilleri, AR ve PSA genlerinin mRNA seviyesindeki ekspresyon değişimleri qPCR ile; miRNA transfeksiyonu ve DHT uygulaması sonrasında 5 günlük süreçte gerçekleşen hücre proliferasyonu da WST-1 yöntemiyle analiz edilmiştir. In silico analiz sonucunda, AR genini hedef aldığı düşünülen 86 adet miRNA tespit edilmiştir. Array analizi sonrasında miR-625 ve miR-874' ün KDPK hücre serilerinde androjene duyarlı hücre serisine göre anlamlı bir şekilde daha fazla eksprese edildiği saptanmış; sonraki analizlerde bu miRNA' ların ekspresyon seviyelerini düşürmek için "anti-miR" oligonukleotidleri kullanılmıştır. Anti-miRNA-874 veya anti-miRNA-625 transfeksiyonu ile belli günlerde hücre proliferasyonunda inhibisyon saptanmıştır. Ayrıca, anti-miR-874 veya anti-miR-625 transfeksiyonu sonrasında, kontrol hücre grubuyla kıyaslandığında AR gen ekspresyon seviyesinin tüm hücre serilerinde arttığı, PSA gen ekspresyonunun ise LNCaP-104R2 dışındaki diğer tüm hücre serilerinde arttığı saptanmıştır. Sonuç olarak, ileride miRNA uygulamalarının KDPK gelişimini önlemede yeni ve alternatif bir tedavi yöntemi olabileceğini düşünmekteyiz.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Prostat kanseri, Kastrasyona Dirençli Prostat Kanseri, miRNA, AR, PSA, array., Prostate cancer, Castration Resistant Prostate Cancer, miRNA, AR, PSA, array., Tıbbi Biyoloji A.B.D.
