DNA taşıyıcı sistem geliştirme amacıyla manyetik nanopartikül formülasyonlarının hazırlanması
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2012
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Projede amacımız katyonik katı lipid nanopartikül formülasonları geliştirerek bunlara manyetik özellik kazandırmak, daha sonra plazmid DNA yükleyerek gen aktarımı amacıyla bir taşıyıcı sistem geliştirmektir. Çalışmamızda ön formülasyon denemelerinde; katı lipid olarak kompritol, lipofilik sürfaktan olarak Span 80, hidrofilik sürfaktan olarak Tween 80 ve ko- sürfaktan olarak Propanol 1 kullanılarak S/Y mikroemülsiyon formülasyonu oluşturulmuştur. Daha sonra Y/S mikroemülsiyon formülasyonu için yine katı lipid olarak kompritol kullanılmış, hidrofilik sürfaktan olarak Tween 80 ve ko-sürfaktan olarak etanol kullanılmıştır. Y/S mikroemülsiyonun yağ fazı yerine 80oC'de S/Y mikroemülsiyon formülasyonu eklenerek S/Y/S çoklu emülsiyon sistem oluşturulmuştur. Sistem oda sıcaklığına soğutularak katı lipid nanopartikül elde edilmiştir. Bu sisteme %1 oranında esterquat eklenerek 23,2 mV zeta potansiyel değerine sahip katyonik KLN elde edilmiştir. Katyonik KLN'lere manyetik özellik kazandırmak için, iç su fazına Fe+2 ve Fe+3 bileşikleri ve alkali olarak 5M NH4OH eklenmiştir. Netice olarak 10,91 nm partikül büyüklüğüne sahip ve zeta potansiyeli 11,30 mV olan manyetik KLN (mKLN) elde edilmiştir. mKLN'lerin manyetik özellikleri titreşimli örnek manyetometresi (VSM) ölçümü ile doğrulanmıştır. Oluşan mKLN'ler ile DNA yükleme çalışmaları için çeşitli oranlarda DNA:mKLN kompleksleri hazırlanmıştır. Hazırlanan DNA:mKLN kompleksler agaroz jele yüklenerek hangi oranlarda kompleksleşmenin gerçekleştiği saptanmıştır. Daha sonra kompleksleşmenin gerçekleştiği oranlarda SDS teşvikli salım çalışmaları yapılarak, komplekslerden DNA'nın salınımı incelenmiştir. Sonuç olarak DNA aktarımı için; 263 nm partikül büyüklüğü ve de 6,60 mV zeta potansiyeline sahip, DNA yüklü ve katyonik özellikli manyetik nanopartikül formülasyonu, amacına uygun olarak geliştirilmiştir.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Farmasötik Biyoteknoloji A.B.D.
