Rasyonel ve evolusyoner enzim dizaynı yolu ile iki (βα)8–barrel enziminin katalitik aktivitelerinin değiştirilmesi
dc.contributor.advisor | Telefoncu, Azmi | |
dc.contributor.advisor | Sterner, Reinhard | |
dc.contributor.author | Evran, Serap | |
dc.date.accessioned | 2017-05-24T11:04:07Z | |
dc.date.available | 2017-05-24T11:04:07Z | |
dc.date.issued | 2009 | |
dc.department | Ege Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü | en_US |
dc.description.abstract | TIM fıçı olarak da bilinen (βα)8-fıçı, enzimlerin fonksiyon, stabilite ve evrimsel özelliklerinin anlaşılmasında mükemmel bir modeldir. Triptofan biyosentez yolundaki üç TIM fıçı, yapısal benzerlikleri ve korunmuş fosfat bağlanma bölgeleri nedeniyle ıraksak evrimle oluşmuş enzimlere en iyi örneklerdir. Yapısal benzerliklere dayanarak fosforibozil antranilat izomeraz (TrpF) ve bifonksiyonel triptofan sentaz α-altbiriminin (TrpA) gen duplikasyonu ve farklılaşma sonucu ortak bir öncüden evrimleştikleri öne sürülmüştür. Bu çalışmada TrpA’ya TrpF aktivitesi kazandırılması için yönlendirilmiş evrim yaklaşımı kullanıldı. trpA geninde error-prone PCR veya DNA shuffling yöntemleri kullanılarak hazırlanan gen kütüphanelerinden in vivo komplementasyon yoluyla TrpF aktivitesine sahip varyantlar seçildi ve in vitro TrpF aktiviteleri belirlendi. TrpF’ye TrpA aktivitesi kazandırılması için rasyonel dizayn yoluyla belirlenen amino asit değişiklikleri gerçekleştirildi ve TrpF varyantının TrpA aktivitesi kazanıp kazanmadığı araştırıldı. | en_US |
dc.identifier.uri | https://hdl.handle.net/11454/4192 | |
dc.language.iso | tr | en_US |
dc.publisher | Ege Üniversitesi | en_US |
dc.relation.publicationcategory | Tez | en_US |
dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | en_US |
dc.subject | TIM fıçı | en_US |
dc.subject | yönlendirilmiş evrim | en_US |
dc.subject | error-prone PCR | en_US |
dc.subject | triptofan biyosentezi | en_US |
dc.subject | TIM barrel | en_US |
dc.subject | directed evolution | en_US |
dc.subject | error-prone PCR | en_US |
dc.subject | tryptophan biosynthesis | en_US |
dc.subject | Biyokimya A.B.D. | en_US |
dc.title | Rasyonel ve evolusyoner enzim dizaynı yolu ile iki (βα)8–barrel enziminin katalitik aktivitelerinin değiştirilmesi | en_US |
dc.type | Doctoral Thesis | en_US |