Biyoreaktörde pilot ölçekli monoklonal antikor üretimi
Yükleniyor...
Tarih
2010
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Bu çalısmada, serumlu ve serumsuz ortamlarda (SFM) pilot ölçekli monoklonal antikor (MAb) üretimi için döner sise (DS), karıstırmalı tank biyoreaktör (STR) ve tek kullanımlık biyoreaktörler gibi farklı kültür sistemleri ile çalısılmıstır. Hücre kültürü çalısmaları, Salmonella Enteritidis’in O-antijen spesifik MAb salgılayan hibridoma klonu (5A8) ile gerçeklestirilmistir. Yüksek miktarda ve verimlilikte ürün alabilmek için kullanılan sistemler, hücrelerin büyüme parametreleri ve MAb verimlilikleri açısından tartısılmıstır. STR’de MAb üretiminde 4 litreye kadar ölçek büyütme yapılmıs ve hücrelerin üretim kapasiteleri reaktördeki pH, sıcaklık, çözünmüs oksijen, havalandırma ve karıstırma hızı gibi parametreler optimize edilerek degerlendirilmistir. Hücrelerin büyüme parametrelerinin belirlenmesi için glukoz tüketimlerine, laktik asit ve amonyak üretimlerine bakılmıstır. Sistemlerdeki MAb verimliligi indirekt ELISA ile ölçülmüstür. Bu çalısmada, 5A8 hibridoma klonunun SFM’e adapte olamadıgı ve SFM ortamında düsük hücre canlılıgı gösterdigi ve düsük MAb titresi elde edildigi belirlenmistir. STR’de, DS’lerde elde edilenden daha yüksek MAb verimliligi elde edildigi ve membran havalandırmalı reaktörde (MHR), DS ve STR’deki üretimlere göre daha uzun süre hücre canlılıgının korundugu ve daha yüksek MAb titresi elde edildigi görülmüstür. En yüksek MAb konsantrasyonu statik membran reaktörde (SMR) elde edilirken, en yüksek MAb verimliligi yarı sürekli modda ve yüzey havalandırma kosullarında çalıstırılan STR’de elde edilmistir.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Hibridoma, monoklonal antikor, pilot ölçek, döner sise, karıstırmalı tank biyoreaktör, tek kullanımlık biyoreaktör, Hybridoma, monoclonal antibody, pilot scale, roller bottles, stirred tank bioreactors, disposable bioreactors, Biyomühendislik A.B.D.
