Polimerik taşıyıcılarda DNA immobilizasyonu
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2001
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
İnsan genom projesiyle DNA teknolojisi gittikçe önem kazanmaktadır.DNA teknolojisinin uygulama alanları arasında gıda, çevre, adli tıp ve sağlık yanında arkeometri de sayılabilir.DNA biyosensörleri de teknolojik gelişmelere paralel olarak daha kullanılabilir, duyarlılığı ve stabilitesi artırılabilir hale getirilmeye başlanmıştır.Biyosensör yüzeyi farklı tür membranlar ile kaplanarak DNA immobilizasyonu spesifik hale getirilmesiyle, örneğin nokta mutasyonların saptanmasında kullanılabilir.Bu çalışmanın amacı DNA'yı 5'-Fosfat ucundan selüloz asetata bağlamak ve böylece hazırlanan membranlar üzerinde çeşitli modifikasyonlar yaparak biyosensör membranı olarak kullanılabilirliğini optimize etmektir.DNA' nın katı bir desteğe bağlanması, biyoteknoloji ve moleküler biyoloji açısından büyük önem taşır.Çeşitli destek materyalleri ile DNA immobilizasyonu genellikle adsorpsiyon veya kimyasal bağlama yoluyla gerçekleştirilir.Tercih edilen kontrollü ve yönlendirilmiş kovalent bağlamadır.1,1'-karbonildiimidazol(CDI) ile aktive edilen selüloz asetatın kuru dioksandaki çözeltisinden çıkılarak farklı kalınlıkta membranlar hazırlandı.Reaktif selüloz asetat membranlar 1,6-diaminohegzan ile kenetlendi ve böylece membran üzerinde DNA'nın bağlanabileceği uzantılar (spacer arm) oluşturuldu.DNA molekülünün membrana spesifik olarak yalnız 5'-ucundan bağlanmasını sağlamak için DNA 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid(EDC) ile 5'-Fosfat grubundan aktive edilidi ve bu grup üzerinden modifiye selüloz asetat membrana kovalent bağlanması gerçekleştirildi.Selüloz asetat modifikasyonu ve DNA immobilizasyonu koşulları optimize edildi.Uzun zincirli bir molekül olan DNA taşıyıcıya yalnız 5'-ucundan bağlanarak ve taşıyıcı membran yüzeyinden uzak tutularak hibridizasyonun etkinleşmesi ve çabuklaşmasına olanak sağlandı.Bu özellik modifiye membran ile DNA biyosensörlerinin hazırlanmasında önemli avantaj sağlamaktadır.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Selüloz asetat, kovalent immobilizasyon, CDI (1,1'Karbonildiimidazol), DNA immobilizasyonu., Cellulose acetate, covalent immobilization, CDI (1,1'Carbonildiimidazole, DNA immobilization., Biyokimya Anabilim Dalı
