Sorafenib dirençli Huh7 hücrelerinde sorafenib direncini geri çevirmede yeni bir tedavi hedefi: Depo kontrollü kalsiyum girişi
Yükleniyor...
Tarih
2024
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Hepatoselüler karsinoma (HSK), küresel olarak kansere bağlı ölümlerin ikinci önde gelen nedenidir ve genellikle kronik karaciğer hastalıkları zemininde ortaya çıkmaktadır. Erken evre HSK'da cerrahi tedaviler uygulanabilse de HSK hastalarının birçoğunun kronik karaciğer rahatsızlıklarının bulunması ve ileri evrede tanı almaları sebebiyle tedavi seçenekleri kısıtlanmaktadır. İleri evre HSK'nın sistemik tedavisinde kullanılan Sorafenib (SOR) HSK tedavisinde onaylı birinci basamak ajandır ve Ras/Raf/MEK/ERK sinyal yolaklarını baskılayarak tümör hücresi proliferasyonunu inhibe etmektedir. SOR tedavisi alan hastaların yaklaşık %30'unun SOR'dan fayda görmesi ve bu hasta grubunun genellikle 6 ay içinde ilaca direnç geliştirmesi sebebiyle HSK'da kemorezistansın üstesinden gelinmesi ve spesifik tedavi seçeneklerinin keşfedilmesine ihtiyaç duyulmaktadır. Depo kontrollü Ca+2 girişi (SOCE) uyarılamayan hücrelerde anjiyogenez, metastaz, hücre göçü, EMT ve ilaç yanıtları gibi birçok sürecin kritik düzenleyicisidir. HSK'da SOCE'nin ve SOCE moleküler bileşenlerinin proliferasyon, hücre göçü, metastaz ve apoptoz üzerindeki etkilerinin yanında, HSK hücrelerinde gelişen kemorezistansta direnci geri çevirebilme potansiyelinin belirlenmesi sonucu HSK'da SOCE'nin potansiyel bir tedavi hedefi olduğu düşünülmektedir. Bu bilgiler ışığında tez çalışmasında SOR direnci geliştirilen Huh7 hücrelerinde (SRHuh7) SOCE'nin farmakolojik olarak inhibisyonu (SKF-96365) ve SOCE'nin moleküler komponenti TRPC1'in baskılanması ile kemorezistans üzerindeki etkileri araştırılmıştır. Huh7 ve SRHuh7 hücrelerinde SOR, SKF-96365 ve SKF-96365+SOR uygulamaları ve TRPC1 baskılanması ile 1)hücrelerin proliferasyon kalıpları, 2) hücre içi Ca+2 dinamiklerindeki değişimler 3) SOCE ilişkili (TRPC1, TRPC6, STIM1 ve Orai1) MDR (MDR1) ve EMT (Vimentin, N-kaderinin ve E-kaderinin) ilişkili genlerin mRNA ve protein ekspresyon düzeyleri, 4)apoptoza bağlı hücre ölümü, 5)hücre göçü düzeyleri ile migrasyon yetenekleri belirlenmiştir. Ayrıca elde edilen bulguların kliniğe yansımasını araştırmak amacıyla çeşitli veritabanlarında (GEPIA, GEO, Kaplan-Meier) in silico analizler gerçekleştirilmiştir. Bulgularımız parental hücrelere kıyasla SRHuh7 hücrelerinde ER Ca+2 salıverilişi, SOCE ve SOCE ile ilişkili mRNA ve protein düzeylerinde arttığı göstermiş, sonuç olarak SOR direninde SOCE'nin rolü olabileceğini göstermektedir. SRHuh7 hücrelerinde SOCE'nin farmakolojik inhibisyonu ve TRPC1 ekspresyonunun baskılanması sonucu proliferasyon hızında ve MDR ilişkili mRNA/ protein ekspresyon düzeylerinde azalış belirlenmiştir. Bunun yanında apoptotik düzeylerini artırmıştır. Dirençli hücrelerde artan EMT ve migrasyon düzeyleri SOCE inhibisyonu ile azalmıştır. İn siliko analiz sonuçlarımız bulgularımızla uyumlu olarak SOR tedavisi alan HSK hastalarında SOCE'yi hedefleyen terapötik yaklaşımların SOR direncini engelleyebilecek veya geciktirebilecek bir tedavi hedefi olabileceğini göstermiştir. Tez çalışmasından elde edilen bulgular SOR dirençli hücrelerde SOCE sinyal yolağının önemli bir rolü olabileceğini ortaya koymuştur. Dirençli hücrelerdeki SOCE artışının direnç gelişiminde bir neden mi yoksa direnç gelişim sürecinin bir sonucu olarak mı ortaya çıktığının belirlenmesi için yeni çalışmaların yapılması gerekmektedir. Bulgularımız zenograf deney modellerinde, SOCE inhibisyonunun tümör oluşumu ve tümör boyutu üzerindeki etkilerinin in vivo olarak incelenmelidir.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
epatosellüler karsinoma, Sorafenib, Depo Kontrollü Kalsiyum Girişi, Kemorezistans., Hepatosellüler karsinoma, Hepatocellular carcinoma, Store-Operated Calcium Entry, Chemoresistance.
