Prostat kanser hücrelerinin belirlenmesi için peptit tabanlı biyosensör sisteminin geliştirilmesi
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2022
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Kanser, geçmişi çok eskilere dayanan ve günümüzde de çaresi bulunamamış, hücre bölünmesi sırasında meydana gelen anomaliler sonucunda insan hayatını ciddi anlamda tehdit eden oldukça kompleks bir hastalıktır. Hastalığın tedavisi erken aşamada teşhisi ile mümkün olmaktadır. Bu nedenle kanser teşhis ve tedavisi amacıyla yapılan çalışmalar geçtiğimiz yüzyıldan beri dikkatleri üzerine toplamaktadır. Son yıllarda teşhis amacıyla uygulanmaya başlayan sıvı biyopsi teknikleri ise etkin bir yöntem olsa dahi kompleks ve pahalı cihazlara ihtiyaç duymaktadır. Bu tez çalışmasında ise sıvı biyopsi için uygun prostat kanseri hücrelerini direkt olarak tayin edebilme yeteneğine sahip bir biyosensör geliştirilmesi amaçlanmıştır. Bu doğrultuda ekran baskılı altın elektrotlar kullanılarak sırasıyla sisteamin, PAMAM, avidin ve biyotinlenmiş AMP Citropin A kullanılarak modifiye edilmiştir. AMP'ler son yıllarda antibiyotiklere alternatif olarak düşünülmelerinin ve geliştirilmelerini yanı sıra birçok kanser türü için de sitotoksik etki göstermektedirler. Bu çalışmada AMP'lerin sitotoksik özelliklerinin yanısıra Citropin A'nın prostat kanseri hücrelerine olan yüksek affinitesinden yararlanılarak biyotanıma ajanı olarak kullanılması hedeflenmiştir. Böylece yüzeyde immobilize halde bulunan AMP örnek içerisindeki prostat kanseri hücrelerine bağlanacak ve direnç değişimine neden olacaktır. Meydana gelen direnç değişimleri ise çalışma süresince elektrokimyasal impedans spektroskopisi (EIS) yardımı ile belirlenmiştir, döngüsel voltammetri (CV) ile doğrulaması gerçekleşitirilmiştir. Kronoimpedimetrik analizlere göre geliştirilen biyosensör, 300 saniye gibi kısa bir süre içerisinde LNCaP hücrelerini, 600 saniye gibi makul bir süre içerisinde de DU-145 ve PC-3 hücrelerini tayin edebildiği görülmüştür. 1500 - 12000 hücre/L konsantrasyon aralığında doğrusal saptama sınırları belirlenmiş, en düşük tayin limiti (LOD) 518 hücre/L; en düşük tayin sınırı (LOQ) değeri 1570 hücre/L olarak hesaplanmıştır. Serum örneği içerisine standart katma ile oluşturulan hücre solüsyonları içerisinde tekrarlanabilirlik, yeniden üretilebilirlik ve seçicilik testleri gerçekleştirilmiştir. Sonuç olarak geliştirilen biyosensör düşük konsantrasyonda bulunan kanserleşmiş prostat hücrelerini, iyi bir seçicilik, yüksek duyarlılık, çok düşük tayin limiti ve büyük bir ekonomik avantaj ile gerçekleştirebilmektedir.;Biyosensör; LNCaP; Kanser; Antimikrobiyal Peptid; İmpedans.;Biosensor; LNCaP Cells; Cancer; Antimicrobial Peptide.
Açıklama
Tıp Fakültesi, Tıbbi Biyokimya A.B.D. Araştırma Projesi
Araştırma Projesi elektronik ortamda bulunmaktadır.
Araştırma Projesi elektronik ortamda bulunmaktadır.
