İnsan endotel hücre kültüründe glibenklamidin etkisi
Küçük Resim Yok
Tarih
2003
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/closedAccess
Özet
GİRİŞ: KATP kanallarının hücre fizyolojisinde ve patofizyolojisinde önemli rolleri olduğu gösterilmiştir. Bu kanalların endotel hücrelerinde de eksprese edildiği çok yakın bir zamanda (Katnik C. et al, Am.J.Physiol.1997) bulunmuş ancak KATP kanal blokörlerinin endotel hücreleri üzerindeki in vitro etkileri henüz incelenmemiştir. Bu çalışmada klasik bir KATP kanal blokörü olan glibenklamidin insan umbilikal ven endotel hücre kültüründe (Human umbilical vein endotheial cell; HUVEC); hücre canlılığı ve süperoksit oluşumu üzerindeki etkilerini incelemeyi amaçladık. METOD: Endotel hücreleri, insan göbek kordonundan izole edildi ve kültürü yapıldı. Elde edilen hücreler (HUVEC) morfolojik olarak ve immünhistokimyasal olarak von Willebrand faktör varlığı gösterilerek karakterize edildi. Hücre canlılığı total protein miktar tayini yapılarak ve nötral kırmızısı uptake yöntemi ile test edildi. Süperoksit radikali oluşumu "SOD'un inhibe edebildiği ferrisitokrom C indirgenmesi" yöntemi ile incelendi. Deneyler %2 buzağı serumu içeren M199 besiyerinde tutulan HUVEC' lerde gerçekleştirildi. SONUÇLAR: HUVEC' lerin 10-4 M glibenklamidle tedavi edilmesi zamana bağımlı bir şekilde hücre canlılığında azalmaya neden oldu.Glibenklamidle kısa süre inkübasyon herhangi bir etkiye neden olmazken (0.5-1 saat), 4-16 saatlik uzun süre inkübasyon, nötral red yöntemi ile ölçülen endotel hücre canlılığında önemli azalmaya neden oldu ( p<0.01 kontrole göre). 10-5 M konsantrasyonda glibenklamid endotel hücre canlılığında azalmaya neden olmadı. Bu durum ilacın serum proteinlerine yüksek oranda bağlanmasının serbest glibenklamid miktarlarını azalttığını ve bu miktarların da HUVEC de KATP kanallarını bloke etmeye yetmediğini düşündürmektedir. Paralel olarak yapılan deneylerde, 10-4 M glibenklamid kontrole kıyasla süperoksit oluşumunda önemli bir artışa neden oldu (sırasıyla 1.199 ± 0.38 ve 0.669 ± 0.34 nmol/kuyu/45 dakika, p<0.01). 250 æM askorbik asit önuygulaması glibenklamidin HUVEC'de neden olduğu hücre canlılığındaki azalmayı kısmen önledi. İnkübasyon süresi arttıkça bu koruyucu etki de arttı. Bu bulgular askorbik asidin bu hücrelerde nitrik oksit üretiminde artışa neden olduğunun bildirildiği araştırmalarla uyum içindedir ve söz konusu koruyucu etkinin nitrik oksitden kaynaklanabileceği fikrini vermektedir. YORUM: Bu çalışmada glibenklamidin HUVEC'de hücre canlılığında azalmaya neden olduğu ve bu etkinin süperoksit radikal miktarındaki artışla ilişkiili olduğu ilk kez tarafımızdan gösterilmiştir. Literatürdeki veriler ışığında, söz konusu etkilerin glibenklamidin HUVEC'de KATP kanallarını bloke etmesine ve membran depolarizasyonuna bağlı gelişebileceği düşünülmektedir.
Açıklama
Araştırma Projesi -- Ege Üniversitesi, 2003
