The examination of the kinetic properties of catalase and immobilized catalase
Küçük Resim Yok
Tarih
1995
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/closedAccess
Özet
Katalaz süt endüstrisinde çözünür enzim olarak kullanılır. Uzun süre kararlı olabilen immobilize enzim türevleri geliştirilmediğinden süt endüstrisinde immobilize katalaz uygulamalarına rastlanmamaktadır. Bunun nedeni katalazın substratı (H2O2) ile inaktivasyonudur ve bu olay tam olarak anlaşılmamıştır. Çalışmamızda jel matriskste katalaz immobilizasyon şartları araştırılması, 2 mg/mg enzim, %0,5 glutaraldehit, jelatin(cmc=2/1 miktarı ve pH=7 optimum koşullar olarak seçilmiştir. pH-aktivite ve termostabilite denemelerinde immobilize enzimin serbest enzimden daha çok pH' ya bağımlı olduğu, termal kararlılığın ise serbest enzime benzediği anlaşılmıştır. Reaksiyon ortamında H2O/enzim mol oranının 2x105ten büyük olduğu durumlarda, seçilen 60 dakikalık reaksiyon süresi içinde ikinci bir ? fazı ile karşılaşıldığı gözlenmektedir. Hesaplanan k1 hız sabiti değerleri dikkate alındığında bu ikinci ? fazında reaksiyon hızının yaklaşık %55-60 azaldığı söylenebilir. 2 mg enzim kullanılarak hazırlanan immobilize enzim örneği için bulunan k1 değeri ?, fazı için 4.10-2 dak-1 ve ?2 fazı için 1.8.10-2 dak-1 olarak saptanmıştır. Ortalama antioxidan ilave ederek bu adımlarda reaksiyon hızlarının değişimi araştırılmıştır. Antioxidan olarak literatürde superoksit radikal (O-2) tutucu belirtilen Butillenmişhidroksi anisol (BHA) ve 4,5-Di-OH-m-Benzene disulfonic asid disodium salt (Tiron) kullanılmıştır. Kullanılan her iki antioksidanın H2O2 ile reaksiyon vermediği saptanmıştır. BHA her iki ? fazını da hızlandırdığı fakat daha büyük etkiyi ?2 fazında enzim deaktivasyonundan O2- radikallerinin sorumlu olduğu söylenebilir. Fakat Tiron durumunda çok farklı bir sonuçla karşılaşılmıştır. Düşük Tiron derişimlerinde her iki ? fazında %35-40 civarında inaktivasyon gerçekleşmiş fakat yüksek Tiron derişimlerinde ?1 fazında yaklaşık %40' a varan bir aktivasyon gözlenirken ?2 fazında reaksiyon hızında bir değişiklik meydana gelmemiştir.
Açıklama
Araştırma Projesi -- Ege Üniversitesi, 1995
