Kemik iliği kökenli mezenkimal kök hücrelerin kültür ortamında çoğaltılan ALL hücre dizilerine (CCRF-CEM) uygulanımı ile anjiyogenezis ve apoptotik yolakların onkogenezis sürecine etkilerinin araştırılması
Küçük Resim Yok
Tarih
2013
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/closedAccess
Özet
Araştırma Projesi--Ege Üniversitesi, 2013;İmmunojenik olmayan mezenkimal kök hücreleri (MKH) immünornödülatör ve immunosupressif özellikleri nedeniyle son yıllarda bazı hemato-onkojenik ve otoimmün hastalıkların tedavilerinde başarıyla kullanılmaktadır. Buna karşılık MKH' in onkogenez ve metastazı indükleme potansiyeline sahip olduğu da bazı çalışmalarda gösterilmiştir. Bu çalışmanın amacı; akult lenfoblastik lösemide (ALL) MKH uygulanırnının onkogenez sürecindeki olası etkilerinin daha iyi anlaşılabilmesidir. Bu amaçla çalışmamızda kemik iliği kökenli insan mezenkimal kök hücrelerin (MKH) kültür ortamında çoğaltılan ALL hücre dizisine (CCRF-CEM) uygulanımı ile apoptoz, hücre döngüsü, tümör süpresyonu ve anjiogenezis üzerindeki etkileri araştırıldı. MKH' den salgılan soluble faktörleri içeren besiyerinin (CCRF-CEM hücrelerinin proliferasyonuna olan etkisi sitotoksisite testleri ile analiz edildi. hMSCs ve CCRF-CEM hücre serileri 72 saat boyunca ko-kültür ortamında inkübe edildikten sonra RNA izolasyonları yapıldı. Q-PCR yöntemi ile apoptoz, hücre döngüsü, tümör süpresyonu, anjiogenezis ve hücre içi sinyal yolakları ile ilişkili 88 genin mRNA ekspresyonu analiz edildi. Ayrıca kaspaz-3, kaspaz-8, kaspaz-9, Bcl-2, Bax, p53, ve VEGF ekspresyonları immünohistokimyasal yöntem ile protein düzeyinde de değerlendirildi. CCRF-CEM hücre dizilerine MKH-CM uygulanımı sonucunda hücre canlılığında anlamlı azalma görüldü. MKH ile ko-kültür sonrasında CCRF-CEM hücrelerinde; büyüme faktörlerinin eksprese edilmeye başladığı, apoptotik yolaklardaki genlerden kaspaz-2,-8,-9,-10, Bak-1 ve APAF1 ekspresyonlarının baskılandığı, CCRF-CEM hücrelerinde normalde ekspresyonu çok az bulunan tümör supressor p53 geninin 5.1 kat arttığı ve hücre içi sinyallerinin oluşmasını sağlayan adaptör proteinlerin ekspresyonlarının baskılandığı saptandı. İmmunohistokimyasal analizler, ko-kültür sonrasında CCRF-CEM hücrelerindeki kaspaz 3, 8 ve Bcl-2 immunoekspresyonlarının baskılandığını, p53 immunoekspresyommun ise arttığını ortaya koydu. Sonuç olarak, çalışmamızda MKH' in ALL hücre dizisine anti-proliferatif etkileri olduğu gözlendi. Bu baskılanma, p53 ve apoptotik kaspaz 3- 8 ekpresyonlarının artışı ve hücre içi sinyal yolaklarındaki gen ekspresyonlarının azalması ile desteklenmiştir.;Mesenchymal stem cells, acute lymphoblastic leukemia, oncogenesis, angiogenesis, apoptosis.;Mezenkimal kök hücre, akut lenfoblastik lösemi, anjiyogenezis, onkogenezis, apoptozis.
Açıklama
Araştırmacılar; Hüseyin Aktuğ, Ahmet Keskinel, Buket Erer Del Castello
Araştırma Projesi -- Ege Üniversitesi, 2013
Araştırma Projesi -- Ege Üniversitesi, 2013
