Kemoterapi sonrası B lenfosit repertuar yenilenme mekanizmalarının belirlenmesi ve modülasyonu
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2007
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Kemoterapi sonrası bağışıklık sisteminin yenilenmesi ile ilgili çalışmalar daha çok T
hücre kompartmanına odaklanmış, B hücreler ise çoğu kez göz ardı edilmiştir. B
hücreler, kemoterapi sonrası teorik olarak ya kemik iliği projenitörlerinden ya da
kemoterapiye dayanıklı matür B hücrelerin periferik ekspansiyonu ile çoğalabilirler. Bu
iki olasılık arasında ayırım yapabilmek için replikatif B hücre yaşamını ölçen bir
teknoloji geliştirdik. V(D)J rekombinasyonu sırasında kombine olan iki gen ile RSS’ler
arasında çift sarmallı DNA’da meydana gelen kırık 4 DNA ucunun ortaya çıkmasına
neden olur: 2 adet kodlayıcı ‘coding’ sekans uçları ve 2 adet RSS uçları. İki adet
‘coding’ sekans ucu birbirine bağlanarak ‘coding joint’ (CJ) oluşur. İki adet RSS
ucunun bağlanması ile de ‘signal joint’ (SJ) oluşur. Yetişkinlerde, CJ’ler TdT yoluyla
nükleotidlerin eklenmesi ile yoğun şekilde modifikasyona uğrarlar. Ek olarak, CJ’lerden
nükleotidler çıkarılabilmektedir. Biz bu çalışmada SJ’lerin detaylı bir sekans analizini
yaptık. Sonuçlarımız, SJ’lerin erişkinlerde CJ’ler kadar modifikasyona uğradığını
göstermektedir. Yetişkinlerin aksine, fetal karaciğerde nükleotid eklenmeleri ya çok az
ya da yok idi. TdT ekspresyonunun erken fetal hayatta sınırlı olduğu ya da hiç olmadığı
bilinmektedir. Bu sonuçlar, daha önce düşünülenin aksine, SJ oluşumunun yetişkin
insanlarda kusursuz olmadığını ve nükleotid eklenmelerinden TdT’nin sorumlu
olabileceğini göstermektedir.
Previous studies of immune recovery following chemotherapy have focused on the T cell compartment. However, The B cell arm of the immune system has been largely ignored. After acute depletion, B cell renewal can theoretically be either via differentiation from bone marrow progenitors or via peripheral expansion of chemoresistant B cells. To distinguish between these posibilities, we developed a technology to measure replicative life span of B cells. During V(D)J recombination, double stranded DNA breaks at the junctions of the two recombining genes and the RSSs result in four DNA ends: the two coding sequence ends and two RSS ends. The two coding sequence ends are ligated together creating the coding joint (CJ). In adults, the coding joints are extensively modified by insertions of random nucleotides by TdT. In addition, nucleotides can be removed from the coding ends. The two blunt ends of the RSSs are also ligated to each other creating a signal joint (SJ). In this study, we performed a sequencing analysis of the SJs in humans. Our results show that the SJs are as extensively modified as the CJs in adults. In contrast, nucleotide insertions were either absent or fewer in fetal liver samples. TdT expression is known to be absent or limited during early fetal life. These results indicate that the SJ formation in adult humans is not precise as previously thought and that TdT may also be responsible for insertion of N nucleotides into the SJs.
Previous studies of immune recovery following chemotherapy have focused on the T cell compartment. However, The B cell arm of the immune system has been largely ignored. After acute depletion, B cell renewal can theoretically be either via differentiation from bone marrow progenitors or via peripheral expansion of chemoresistant B cells. To distinguish between these posibilities, we developed a technology to measure replicative life span of B cells. During V(D)J recombination, double stranded DNA breaks at the junctions of the two recombining genes and the RSSs result in four DNA ends: the two coding sequence ends and two RSS ends. The two coding sequence ends are ligated together creating the coding joint (CJ). In adults, the coding joints are extensively modified by insertions of random nucleotides by TdT. In addition, nucleotides can be removed from the coding ends. The two blunt ends of the RSSs are also ligated to each other creating a signal joint (SJ). In this study, we performed a sequencing analysis of the SJs in humans. Our results show that the SJs are as extensively modified as the CJs in adults. In contrast, nucleotide insertions were either absent or fewer in fetal liver samples. TdT expression is known to be absent or limited during early fetal life. These results indicate that the SJ formation in adult humans is not precise as previously thought and that TdT may also be responsible for insertion of N nucleotides into the SJs.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
B Lenfosit, V(D)J Rekombinasyonu, B Lymphocyte, V(D)J Recombination
