Ginkgo biloba L.'da kallus kültürleri yolu ile in vitro rejenerasyon
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2005
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Ege Üniversitesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Bu araştırmada, Ginkgo biloba L. türüne ait İzmir koşullarında yetişen bir dişi ve iki erkek ağacın yaprak ve sap eksplantlarının öncelikle altı değişik besin ortamında, aydınlık ve karanlık ortam koşullarında kallus oluşturma potansiyelleri ve oluşan kallusların iki farklı besin ortamındaki rejenerasyon potansiyelleri incelenmiştir. Ayrıca, İzmir koşullarında yetişen 6 farklı G. biloba ağacından alınan yaprak örneklerinde ve rejenerasyona uğramamış kalluslarda kersetin, kemferol ve doğada yalnızca G. bilobaʼdan elde edilebilen GB-2 flavonoidlerinin varlığı, ince tabaka kromatografisi (İTK) yöntemi ile araştırılmıştır. Yaprak ve sap parçaları, yüzeysel sterilizasyon işlemleri yapıldıktan sonra, aydınlık ve karanlık koşullarda aynı konsantrasyonda üç farklı oksin içeren (1mg/L Indol Asetik Asit, 1mg/L Indol Bütirik Asit ve 1mg/L Naftalen Asetik Asit) MS (Murashige & Skoog, 1962) ve odunsu bitkilere uygun olan ve aynı konsantrasyondaki oksinleri içeren üç farklı WPM (Lloyd & McCown, 1980) besin ortamlarında kallus elde edilmek üzere kültüre alınmıştırlar. En iyi kallus gelişimi 1mg/L NAA ve 0.1mg/L Kinetin içeren WPM (6 noʼlu ortam) besin ortamında gözlenmiştir. Gelişen kalluslar, 1mg/L Kinetin, 1mg/L BA (6-Benzil adenin) ve 0.5mg/L IBA içeren MS ve WPM ortamlarında rejenere edilmeye çalışılmıştır. Denemede, 6 noʼlu ortamda (1mg/L NAA+0.1mg/L Kinetin+WPM), karanlık koşullarda, sap eksplantından sürgün rejenerasyonu ve yaprak eksplantından kök rejenerasyonu sağlanmıştır. Temmuz ayında toplanan 6 farklı G. biloba ağacına ait yaprak eksplantlarında gerçekleştirilen ince tabaka kromatografi analizlerinde GB-2 major flavonoidinin, sadece 1 ağaçta (6 noʼlu ağaç) bulunmasına karşın, kersetin ve kemferol flavonoidlerinin araştırmada kullanılan 6 ağaçta da olmadığı sonucuna varılmıştır. Ekim ayında gerçekleştirilen ikinci çalışmada, kersetin ve kemferol metabolitleri için sonuç değişmezken, GB-2 flavonoidinin varlığı, 6 numaralı ağaçla birlikte 3 noʼlu ağaçta da ortaya çıkmıştır. Bu flavonoidlerin varlıkları, üzerlerinde kallusları bulunduran yaprak örneklerinin ve yapraklardan izole edilen kallus örneklerinin kullanıldıkları iki ayrı kromatografik deneme ile araştırılmıştır. Yapılan her iki araştırmada da in vitro çalışmalarda kullanılan ağaçlardan elde edilen bu örneklerin ilgili flavonoidleri içermedikleri görülmüştür.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Ginkgo biloba L., kallus, rejenerasyon, kemferol, kersetin, GB-2, flavonoid, ince tabaka kromatografisi., Ginkgo biloba L., calli, regeneration, kaempferol, quercetin, GB-2, flavonoid, thin layer chromatography., Biyomühendislik A.B.D.